1.Υπολογίστε τον επιθυμητό αριθμό μικροπηγαδιών. Αφαιρέστε τα υπόλοιπα μικροπηγάδια και τοποθετήστε τα με ξηραντικό στην
επανασφραγιζόμενη πλαστική σακούλα, σφραγίστε και αποθηκεύστε στους 2-8°C για μελλοντική χρήση.
2.Προσθήκη Βαθμονομητών και Δειγμάτων:
2. 1 Πηγάδι ελέγχου (Blank): Μην προσθέτετε αντιδραστήρια.
2. 2 Πηγάδια Βαθμονομητών: Προσθέστε 100 μL Βαθμονομητών στα καθορισμένα πηγάδια ελέγχου.
2.3 Πηγάδια Δοκιμής: Προσθέστε 100 μL Διαλυτικού Δείγματος στα πηγάδια δοκιμής, στη συνέχεια προσθέστε 10 μL δείγματος στο αντίστοιχο πηγάδι.
2.4 Ανακινήστε απαλά την πλάκα για 20 δευτερόλεπτα, και στη συνέχεια καλύψτε την πλάκα με το κάλυμμα.
3.Επώαση:Επωάστε την πλάκα στους 37°C για 30 λεπτά.
4.Βήμα Πλύσης (Μπορεί να γίνει χειροκίνητα ή με αυτοματοποιημένο πλυντήριο):
Χειροκίνητη πλύση: Αφαιρέστε προσεκτικά το μείγμα επώασης απορρίπτοντας το διάλυμα σε δοχείο αποβλήτων. Γεμίστε κάθε
πηγάδι με 350 μL αραιωμένου διαλύματος πλύσης και ανακινήστε απαλά για 20-30 δευτερόλεπτα. Απορρίψτε εντελώς το διάλυμα πλύσης. Επαναλάβετε 4
επιπλέον φορές. Μετά την ολοκλήρωση του τελευταίου βήματος πλύσης, χτυπήστε την πλάκα σε απορροφητικό χαρτί για να αφαιρέσετε το υπολειπόμενο υγρό.
Αυτοματοποιημένη πλύση: Το αυτόματο πλυντήριο πλακών πρέπει να βαθμονομηθεί για να διασφαλιστεί αποτελεσματική πλύση. Γεμίστε κάθε πηγάδι με 350 μL
αραιωμένου διαλύματος πλύσης και αφήστε το να εμποτιστεί για 20-30 δευτερόλεπτα. Αναρροφήστε όλα τα πηγάδια εντελώς. Επαναλάβετε 4 επιπλέον φορές.
5.Σύζευξη: Προσθέστε 100 μL σύζευξης σε κάθε πηγάδι εκτός από το πηγάδι ελέγχου (Blank Well).
6.Επώαση: Καλύψτε τα πηγάδια και επωάστε στους 37°C για 30 λεπτά.
7.Βήμα Πλύσης: Πλύνετε την πλάκα 5 φορές όπως περιγράφεται στο βήμα 4.
8.Υπόστρωμα: Προσθέστε 50 μL Υποστρώματος Α και 50 μL Υποστρώματος Β σε κάθε πηγάδι, συμπεριλαμβανομένου του πηγαδιού ελέγχου (Blank Well). Ανακινήστε απαλά τα
μικροπηγάδια για 20 δευτερόλεπτα. Επωάστε στους 37°C στο σκοτάδι για 15 λεπτά.
9.Διάλυμα Διακοπής: Προσθέστε 50 μL Διαλύματος Διακοπής σε κάθε πηγάδι. Θα πρέπει να αναπτυχθεί ένα κίτρινο χρώμα στα πηγάδια που περιέχουν Θετικά δείγματα.
10.Ανάγνωση Αποτελεσμάτων: Διαβάστε στα 450/630-700 nm εντός 30 λεπτών.
1. Σημείωση: Η μικροπλάκα μπορεί επίσης να διαβαστεί στα 450 nm, αλλά συνιστάται έντονα να διαβαστεί στα 450/630-700 nm για
καλύτερα αποτελέσματα.
Το μήνυμά σας πρέπει να αποτελείται από 20-3.000 χαρακτήρες!
Greek
