1- Υπολογίστε τον επιθυμητό αριθμό μικροκηλίδων.
επανασφραγίσιμη πλαστική σακούλα, σφραγίζεται και φυλάσσεται στους 2- 8°C για μεταγενέστερη χρήση.
2.Προσθέστε βαθμονόμους και δείγματα:
2.1 Κουζίνα κενή: Δεν προστίθενται αντιδραστήρες.
2.2 Πυρήνες βαθμονόμησης: Προσθέστε 100 μL βαθμονόμησης στις καθορισμένες πύλες ελέγχου.
2.3 Πυρήνες δοκιμής: Προστίθενται 100 uL δείγματος αραιωτικού στα πηγάδια δοκιμής και στη συνέχεια προστίθενται 10 uL δείγματος στο αντίστοιχο πηγάδι.
2.4 Κουνήστε απαλά την πλάκα για 20 δευτερόλεπτα και, στη συνέχεια, καλύψτε την πλάκα με το σφραγιστικό.
3. Εμβολιασμός:Εμβολιασμός της πλάκας σε θερμοκρασία 37°C για 30 λεπτά.
4. Βήμα πλύσης (Μπορεί να εκτελεστεί χειροκίνητα ή με αυτοματοποιημένο πλύσιμο):
Χειροκίνητο πλύσιμο: Αφαιρέστε προσεκτικά το μείγμα επώασης, πετώντας το διάλυμα σε δοχείο απορριμμάτων.
Το διάλυμα απορρίπτεται εντελώς.
Μετά την ολοκλήρωση του τελευταίου βήματος πλύσης, χτυπήστε την πλάκα πάνω σε απορροφητικό χαρτί για να αφαιρέσετε το υπολειπόμενο υγρό.
Αυτοματοποιημένο πλύσιμο: Το αυτόματο πλυντήριο πιάτων πρέπει να βαθμολογείται για να εξασφαλίζεται αποτελεσματικό πλύσιμο.
Ατμοσφαιρική ατμοσφαιρική ατμοσφαιρική ατμόσφαιρα
5Συνοδευτικό: Προσθέστε 100 μL συνοδευτικού σε κάθε πηγάδι εκτός από το κενό πηγάδι.
6. Εμφύλιση: Καλύψτε τα πηγάδια και επώλιση σε θερμοκρασία 37°C για 30 λεπτά.
7Βήμα πλύσης: πλύνετε το πιάτο 5 φορές όπως περιγράφεται στο βήμα 4.
8Υποστρώμα: Προσθέστε 50 μL υποστρώματος Α και 50 μL υποστρώματος Β σε κάθε πηγάδι, συμπεριλαμβανομένου του κενού πηγάδι.
Μικροτρύπες για 20 δευτερόλεπτα.
9. Διαλύμα Stop: Προσθέστε 50 μL διαλύματος Stop σε κάθε πηγάδι.
10Διάβασμα των αποτελεσμάτων: ανάγνωση σε 450/630-700 nm εντός 30 λεπτών.
1Σημείωση: Η μικροπίνακα μπορεί επίσης να διαγνωστεί σε 450 nm, αλλά συνιστάται να διαγνωστεί σε 450/630-700 nm για
καλύτερα αποτελέσματα.
Χρονομετρία: Διαβάστε την οπτική πυκνότητα (OD) του δείγματος σε 450nm με έναν αναγνώστη μικροπίνακων.
Η μέση τιμή OD του αρνητικού ελέγχου ≤ 0,1 και η μέση τιμή OD του θετικού ελέγχου ≥ 0.8, η δοκιμή είναι έγκυρη,
Διαφορετικά, η δοκιμή είναι άκυρη.
Αξία διακοπής (CO) = Η μέση τιμή OD του αρνητικού ελέγχου x 3 (υπολογίζεται με 0,10 όταν ο μέσος όρος
Η τιμή OD του αρνητικού ελέγχου είναι < 0.10, υπολογίζεται με βάση την πραγματική αξία όταν ο μέσος όρος αρνητικού ελέγχου OD
Το μήνυμά σας πρέπει να αποτελείται από 20-3.000 χαρακτήρες!
Greek
