Κιτ ELISA για Ανίχνευση CMV IgG

ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ

Το τεστ ELISA CMV IgG προορίζεται για την ανίχνευση και την ποσοτική προσδιορισμό αντισωμάτων IgG έναντι του CMV σε ανθρώπινους ορούς.

ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΕΞΕΤΑΣΗΣ

• Προετοιμασία αντιδραστηρίων: Αραιώστε 1 όγκο Διαλύματος Πλύσης (20×) με 19 όγκους απεσταγμένου νερού, ανακατέψτε καλά.
• Προσθήκη Δειγμάτων: Ανοίξτε τη θήκη αλουμινίου και αφαιρέστε το Μικροπλάσμα. Ορίστε 1 φρεάτιο ως κενό, 2 φρεάτια ως αρνητικό μάρτυρα, 2 φρεάτια ως θετικό μάρτυρα. Μετά τη διανομή 100μL Διαλύματος Δείγματος, διανείμετε 10μL δείγματος, 100μL αρνητικού μάρτυρα ή θετικού μάρτυρα στα αντίστοιχα φρεάτια (χωρίς Διάλυμα Δείγματος). Ανακινήστε απαλά την πλάκα.
• Επώαση: Καλύψτε το Μικροπλάσμα με το κάλυμμα της πλάκας και επωάστε το Μικροπλάσμα σε υδατόλουτρο ή επωαστή μικροπλακών με ελεγχόμενη θερμοκρασία στους 37°C για 30 λεπτά.
• Πλύσιμο της Πλάκας: Αφαιρέστε το κάλυμμα της πλάκας. Αναρροφήστε το περιεχόμενο όλων των φρεατίων. Γεμίστε τα φρεάτια με το αραιωμένο διάλυμα πλύσης (10~20 δευτερόλεπτα εμποτισμού) και στη συνέχεια αναρροφήστε ξανά. Επαναλάβετε τη διαδικασία για 5 φορές. Βεβαιωθείτε ότι ο υπολειπόμενος όγκος είναι ελάχιστος, χτυπώντας την πλάκα σε απορροφητικό χαρτί.
• Προσθήκη Συζεύγματος: Προσθέστε 100μL συζεύγματος σε κάθε φρεάτιο (εκτός από το κενό φρεάτιο).
• Επώαση: Καλύψτε το Μικροπλάσμα και επωάστε την πλάκα στους 37°C για 30 λεπτά.
• Πλύσιμο της Πλάκας: Επαναλάβετε τη διαδικασία πλύσης όπως στο βήμα 4.
• Προσθήκη Υποστρώματος: Προσθέστε 50μL Διαλύματος Υποστρώματος Α και 50μL Διαλύματος Υποστρώματος Β σε κάθε φρεάτιο, ανακατέψτε καλά. Καλύψτε και επωάστε στους 37°C για 15 λεπτά.
• Διακοπή αντίδρασης: Προσθέστε 50μL Διαλύματος Διακοπής σε κάθε φρεάτιο, ανακατέψτε καλά.
• Διαβάστε την απορρόφηση στα 450 nm. Εάν χρησιμοποιείται μέτρηση διπλού μήκους κύματος, το μήκος κύματος αναφοράς θα πρέπει να επιλέγεται από 620nm έως 690nm.

Αποθήκευση

• Αποθηκεύστε στους 2-8°C.

• Τοποθετήστε τα αχρησιμοποίητα φρεάτια στη θήκη αλουμινίου με φερμουάρ και επιστρέψτε στους 2-8 °C, υπό τις οποίες συνθήκες τα φρεάτια θα παραμείνουν σταθερά για 2 μήνες, ή μέχρι την αναγραφόμενη ημερομηνία λήξης, όποιο συμβεί νωρίτερα.

• Σφραγίστε και επιστρέψτε τους αχρησιμοποίητους βαθμονομητές στους 2-8 °C, υπό τις οποίες συνθήκες η σταθερότητα θα διατηρηθεί για 1 μήνα, για μεγαλύτερη χρήση, αποθηκεύστε τους ανοιχτούς βαθμονομητές σε αλικοτο και καταψύξτε στους -20 °C. Αποφύγετε πολλαπλούς κύκλους κατάψυξης-απόψυξης.

• Σφραγίστε και επιστρέψτε όλα τα άλλα αχρησιμοποίητα αντιδραστήρια στους 2-8 °C, υπό τις οποίες συνθήκες η σταθερότητα θα διατηρηθεί για 2 μήνες, ή μέχρι την αναγραφόμενη ημερομηνία λήξης, όποιο συμβεί νωρίτερα.