TB-IGRA ELISA TEST KIT

1. Αρχή

Το TB-IGRA είναι μια in vitro διαγνωστική εξέταση που ανιχνεύει κυτταρομεσολαβούμενες ανοσολογικές αποκρίσεις σε Mycobacterium tuberculosis (MTB) μόλυνση μετρώντας την ιντερφερόνη-γάμμα (IFN-γ) που απελευθερώνεται από ευαισθητοποιημένα Τ κύτταρα μετά από διέγερση με ειδικά αντιγόνα MTB (π.χ., ESAT-6, CFP-10 και TB7.7).

2. Βασικά χαρακτηριστικά

• Υψηλή Ειδικότητα:

  • Χρησιμοποιεί ειδικά αντιγόνα MTB (απουσιάζουν στο BCG και στα περισσότερα μη φυματιώδη μυκοβακτήρια), ελαχιστοποιώντας τα ψευδώς θετικά.

• Υψηλή Ευαισθησία:

  • Ανιχνεύει τόσο ενεργή φυματίωση όσο και λανθάνουσα μόλυνση από φυματίωση (LTBI) με ανώτερη ακρίβεια σε σύγκριση με τη δοκιμασία δέρματος με τουμπερκουλίνη (TST).

• Ποσοτικά/Ποιοτικά Αποτελέσματα:

  • Η έξοδος ποικίλλει ανάλογα με την πλατφόρμα (π.χ., καταμέτρηση κηλίδων σε αναλύσεις ELISPOT ή συγκέντρωση IFN-γ σε ELISA).

• Γρήγορη Επεξεργασία: Τα αποτελέσματα είναι συνήθως διαθέσιμα εντός 24–48 ωρών.

3. Απαιτήσεις Δείγματος

• Τύπος Δείγματος: Φρέσκο περιφερικό ολόκληρο αίμα (με ηπαρίνη).

• Όγκος: Συνήθως 1–3 mL ανά εξέταση (διαφέρει ανάλογα με τον κατασκευαστή του κιτ).

• Αποθήκευση: Επεξεργασία εντός 8–32 ωρών (ανάλογα με τις προδιαγραφές του κιτ).

4. Διαδικασία Δοκιμασίας

1. Διέγερση: Επώαση αίματος με αντιγόνα MTB και μάρτυρες (αρνητικός/μιτογόνος μάρτυρας).

2. Ανίχνευση IFN-γ:

   • Βασισμένο σε ELISPOT (π.χ., T-SPOT.TB): Καταμέτρηση Τ κυττάρων που εκκρίνουν IFN-γ ως κηλίδες.

   • Βασισμένο σε ELISA (π.χ., QuantiFERON-TB Gold): Μέτρηση συγκέντρωσης IFN-γ μέσω ανοσοδοκιμασίας.

3. Ερμηνεία:

   • Αποτελέσματα σε σύγκριση με τιμές αποκοπής (διαφέρει ανάλογα με τη δοκιμασία).

   • Τα ασαφή αποτελέσματα ενδέχεται να απαιτούν επανεξέταση.

5. Μετρικές Απόδοσης

• Ευαισθησία: >90% για ενεργή φυματίωση, ~80% για LTBI.

• Ειδικότητα: >95% (δεν επηρεάζεται από τον εμβολιασμό BCG).

• Διασταυρούμενη δραστικότητα: Ελάχιστη με μη φυματιώδη μυκοβακτήρια (NTM).

6. Ενδείξεις

• Έλεγχος για LTBI σε ομάδες υψηλού κινδύνου (π.χ., HIV+, ανοσοκατεσταλμένοι ασθενείς, στενές επαφές).

• Συμπληρωματική εξέταση για τη διάγνωση ενεργού φυματίωσης (πρέπει να συσχετίζεται με κλινικά συμπτώματα και άλλες εξετάσεις).

7. Πλεονεκτήματα έναντι TST

• Δεν υπάρχει διασταυρούμενη δραστικότητα με BCG.

• Δοκιμή σε μία επίσκεψη (χωρίς επιστροφή για ανάγνωση).

• Αντικειμενικά, εργαστηριακά αποτελέσματα.

8. Περιορισμοί

• Δεν μπορεί να διακρίνει την ενεργό φυματίωση από την LTBI.

• Απαιτεί εξειδικευμένο εργαστηριακό εξοπλισμό.

• Υψηλότερο κόστος από το TST.

• Δυνατότητα ψευδώς αρνητικών αποτελεσμάτων σε ανοσοκατεσταλμένους ασθενείς.

9. Συμβατά Κιτ (Παραδείγματα)

• T-SPOT.TB (Oxford Immunotec): Βασισμένο σε ELISPOT.

• QuantiFERON-TB Gold Plus (Qiagen): Βασισμένο σε ELISA.

10. Ρυθμιστικό καθεστώς

• Εγκρίθηκε από FDA/CE/WHO για έλεγχο μόλυνσης από φυματίωση.

Διαγνωστικό In Vitro

Μόνο για χρήση

Αυτό το κιτ περιέχει αντιδραστήρια επαρκή για τη δοκιμή μέγιστου αριθμού 28 δειγμάτων σε μια δοκιμαστική σειρά. Συστατικά διέγερσης:

1. Αρνητικός Μάρτυρας (Γκρι καπάκι)

2. Αντιγόνο TB, λυοφιλοποιημένο (Μωβ καπάκι)

3. Διαλυτικό Αντιγόνου TB (Μωβ καπάκι)

4. Θετικός Μάρτυρας (Κόκκινο καπάκι) 28tests 28tests 0.9mL 28tests

Συστατικά ELISA

1. Microplate Strips

2. Ανθρώπινη IFN-γ Standard, λυοφιλοποιημένη (Μπλε καπάκι)

3. Διαλυτικό

4. Αντισώματα με σήμανση βιοτίνης (Κίτρινο καπάκι) 12x 8 well 2 x vial 1 x 40mL 1 x 6mL

5. Ενζυμικό συζυγές 100X Συμπύκνωμα (Καφέ φιάλη) 1 x 130μL

6. Wash Buffer 10X Συμπύκνωμα 1 x 40mL

7. Χρωμογόνο διάλυμα Α

8. Χρωμογόνο διάλυμα Β

9. Διάλυμα διακοπής 1 x 6mL 1 x 6mL 1 x 6mL

ΑΡΧΗ ΤΗΣ ΔΟΚΙΜΗΣ