Αντισώμα κατά του ιού της ηπατίτιδας Β Κεντρικό Αντίγον (HBcAb)

ΕΛΙΣΑ Τβ)Κ- Ναι.

Για διαγνωστική χρήση in vitro και επαγγελματική χρήση μόνο.

Ονομασία του προϊόντος

Ελέγχου ELISA κατά HBc (Σόρος/Πλάσμα)

Σκοπός

Αυτό το anti- HBc ELISA Test Kit είναι μια ποιοτική ανίχνευση των αντισωμάτων στο αντιγόνο πυρήνα του ιού της ηπατίτιδας Β (HBcAb) στον ανθρώπινο ορό/ πλάσμα.Το αντιδραστήρα είναι κατάλληλο για κλινική εξέταση και διάγνωση της λοίμωξης από τον ιό της ηπατίτιδας Β στον ανθρώπινο ορό/πλασμα..

Δοκιμαστική αρχή

Ο ιός της ηπατίτιδας Β (HBV) είναι ένας φάκελος,διπλού νήματος ιός DNA που ανήκει στην οικογένεια Hepadnaviridae και αναγνωρίζεται ως η κύρια αιτία της αιμομεταδιδόμενης ηπατίτιδας μαζί με τον ιό της ηπατίτιδας C (HCV)Η λοίμωξη με τον ιό HBV προκαλεί ένα φάσμα κλινικών εκδηλώσεων που κυμαίνονται από ήπια, αόρατη ασθένεια έως fulminated ηπατίτιδα, σοβαρές χρόνιες ασθένειες του ήπατος,που σε ορισμένες περιπτώσεις μπορεί να οδηγήσει σε κίρρωση και καρκίνο του ήπατοςΗ ταξινόμηση της λοίμωξης από ηπατίτιδα Β απαιτεί τον προσδιορισμό αρκετών ορολογικών δεικτών που εκφράζονται κατά τη διάρκεια τριών σταδίων (εμβολιασμός, οξεία και αναρρωτική) της λοίμωξης.

Το κύριο συστατικό του ιού είναι το αντιγόνο πυρήνα της ηπατίτιδας Β (HBcAg).Αυτό το αντιγόνο του πυρήνα αποτελείται από ένα μονοπλεπτίδιο περίπου 17kD που απελευθερώνεται κατά τη διάσπαση των σωματιδίων του πυρήνα.. Τουλάχιστον ένας ανοσολογικός καθοριστικός παράγοντας είναι παρών στο αντιγόνο.

Λίγο μετά την έναρξη της HBsAg, εμφανίζονται αντισώματα κατά της HBcAg (συνολικά αντισώματα και IgM κατά της HBc) και δεν εξαφανίζονται ποτέ.η λοίμωξη από ηπατίτιδα Β μπορεί να προσβληθεί χωρίς ανοσολογικά ανιχνεύσιμα αντι- HBcΗ εξέταση για τα αντι-HBc παρέχει δεδομένα σχετικά με τον επιπολασμό της ηπατίτιδας Β σε διάφορους πληθυσμούς.χρόνιοΗ ταυτοποίηση των αντι- HBc είναι ζωτικής σημασίας κατά τη διάγνωση σε κλινικό περιβάλλον.ο δείκτης anti-HBc επιτρέπει τη σωστή διάγνωση και την κατάλληλη παρακολούθηση της εξέλιξης του ιούΤο anti- HBc μπορεί ενδεχομένως να είναι ο μόνος δείκτης λοίμωξης από ηπατίτιδα Β (συμπεριλαμβανομένων άλλων εξετάσεων ασθενών με HBsAg αρνητικό).

Το σύστημα της δοκιμής HBcAb ELISA βασίζεται στην αρχή της ανταγωνιστικότητας της στερεής φάσης, της μονοβελικής επώασης.ανταγωνίζεται με μονοκλωνικό αντι-HBc συνδυασμένο με υπεροξειδάση κρέμας (HRP-Conjugate) για μια σταθερή ποσότητα καθαρισμένου HBcAg προστρωμένου στη μικροπίνακαΕάν δεν υπάρχει αντι-HBc, το HRP-συμπυκνωμένο αντι-HBc θα δεσμευτεί μαζί με τα αντιγόνα μέσα στα πηγάδια.Μετά την προσθήκη των διαλύσεων χρωμογόνων Α και Β στα πηγάδια και κατά τη διάρκεια της επώασηςΗ παρουσία αντισωμάτων προς το HBcAg στο δείγμα υποδεικνύεται από χαμηλό χρώμα, το οποίο σημαίνει ότι το δείγμα έχει χαμηλό χρώμα.ή καθόλου χρώμα.

ΠΡΟΣΑΧΕΙΑ ΔΕΣΜΟΥ

1.Συλλογή δειγμάτων:Δεν απαιτείται ειδική προετοιμασία του ασθενούς. Συλλέξτε το δείγμα σύμφωνα με την κανονική εργαστηριακή πρακτική.Το αίμα που συλλέγεται με φλεβική τρύπα πρέπει να επιτρέπεται να πήξει φυσικά και πλήρως ∙ ο ορός πρέπει να διαχωρίζεται από τον θρόμβο το συντομότερο δυνατόν για να αποφευχθεί η αιμόλυση των ερυθρών αιμοσφαιρίων.Πρέπει να λαμβάνεται μέριμνα ώστε τα δείγματα ορού/ πλάσματος να είναι διαυγή και να μην έχουν μολυνθεί από μικροοργανισμούς.

2.Hτα ελάχιστα λιπαεμικά, ικτερίνια ή αιμολυτικά δείγματα δεν πρέπει να ΧρησιμοποιείταιΌπως μπορούν να δώσουν λανθασμένα αποτελέσματα στο τεστ.Μην ενεργοποιήσετε τη θερμότητα. δείγματαΑυτό μπορεί να προκαλέσει επιδείνωση του στόχου αναλυτικού.

3Το HBcAb ELISA προορίζεται ΠΑΝΟ για τη δοκιμή μεμονωμένων δειγμάτων ορού/ πλάσματος.

4Μεταφορά και Αποθήκευση: Αποθήκευση δειγμάτων σε 2-8°C. Τα δείγματα που δεν απαιτούνται για δοκιμή εντός 3 ημερών θα πρέπει να αποθηκεύονται παγωμένα (-20°C ή χαμηλότερα).Για αποστολήΤα δείγματα θα πρέπει να συσκευάζονται και να επισημαίνονται σύμφωνα με τους υφιστάμενους τοπικούς και διεθνείς κανονισμούς για τη μεταφορά κλινικών δειγμάτων και εθολογικών παραγόντων.

ΕΠΙΤΡΟΠΗ Δοκιμής

1Όλα τα αντιδραστήρια πρέπει να αφήνονται να φτάσουν σε θερμοκρασία δωματίου για 15 λεπτά πριν από τη χρήση.

2. Το μπουφέρι πλύσης αραιώνεται με ρυθμό 1: 40 με αποσταγμένο νερό πριν από τη χρήση.

3Το δείγμα θα πρέπει να αντιστοιχεί στον αριθμό των μικροπίνακων, κάθε πλάκα θα πρέπει να είναι εφοδιασμένη με αρνητικό έλεγχο 3 πηγάδια, θετικό έλεγχο 2 πηγάδια και κενό έλεγχο 1 πηγάδι.(Εάν ανιχνεύεται με ανίχνευση διπλού μήκους κύματος, δεν επιτρέπεται η ρύθμιση κενού ελεγκτικού πηγάδι).

Σημείωση: Για κάθε δείγμα, αρνητικό και θετικό έλεγχο, χρησιμοποιείται ξεχωριστή άκρη πιπετίδας διάθεσης, ώστε να αποφεύγεται η διασταυρούμενη μόλυνση.

4. Προσθέστε δείγμα 50μL στο αντίστοιχο πηγάδι (Όταν το εν λόγω κιτ χρησιμοποιείται για κλινική βοηθητική διάγνωση, το προς εξέταση δείγμα πρέπει να αραιώνεται με φυσιολογικό θαλασσινό διάλυμα στις 1:30 για εξέταση.Όταν χρησιμοποιείται για επιδημιολογική έρευνα, το αρχικό δείγμα μπορεί να ανιχνευθεί ), προστίθενται 50μL αρνητικός έλεγχος και θετικός έλεγχος σε πηγάδια αρνητικού ελέγχου και θετικού ελέγχου.Αντίστοιχα προσθήκη του συνδυασμένου ενζύμου 50μL (μην προσθέσετε στο κενό πηγάδι).

5. Ανακινήστε για 30 δευτερόλεπτα με έναν ταλαντωτή (αυτό το βήμα είναι πολύ σημαντικό).

6Στο τέλος της επώασης, αφαιρέστε και πετάξτε το κάλυμμα του πιάτου. Βγάλτε το, προσθέστε μπουφέρ πλύσης σε κάθε πηγάδι για 20 δευτερόλεπτα. Επαναλάβετε 5 φορές. Μετά τον τελευταίο κύκλο πλύσης, το νερό θα πρέπει να απομακρυνθεί.στρίψτε την πλάκα σε χαρτί ή καθαρή πετσέτα, και χτυπήστε το για να αφαιρέσετε τα υπολείμματα.

7. Προσθέστε το υποστρώμα Α (50μL) και το υποστρώμα Β (50μL) (μην προσθέσετε στο κενό πηγάδι). Ανακατέψτε απαλά με ανακίνηση. Καλλιεργήστε σε θερμοκρασία 37 °C για 15 λεπτά με τη μεμβράνη της πλάκας σφράγισης να σφραγίζει την πλάκα.

8. Προσθέστε 50μL διαλύματος Stop σε κάθε πηγάδι (μην προσθέσετε στο κενό πηγάδι).Καλιμπρώστε τον αναγνώστη πλάκας με το κενό καλά και να διαβάσετε την απορρόφηση σε 450nm.Εάν χρησιμοποιείται όργανο διπλού φίλτρου, ορίστε το μήκος κύματος αναφοράς στα 630nm. Δεν επιτρέπεται ο καθορισμός κενών πηγών εάν χρησιμοποιείται διπλό μήκος κύματος για ανίχνευση. Υπολογίστε την τιμή διαχωρισμού και αξιολογήστε τα αποτελέσματα.