Ferritin εξάρτηση της Elisa

Ferritin
REF: Δοκιμές DS177720 96

Προοριζόμενη χρήση

Immunoassay για το τεχνητό ποσοτικό προσδιορισμό ferritin στον ανθρώπινο ορό.

Περίληψη

Ferritin είναι ένα μακρομόριο με ένα μοριακό βάρος του kD τουλάχιστον 440 (ανάλογα με την περιεκτικότητα σε σίδηρο) και αποτελείται από ένα πρωτεϊνικό κοχύλι (apoferritin) 24 υπομονάδων και ενός πυρήνας σιδήρου που περιέχει έναν μέσο όρο περ. 2500 ιόντων Fe3+ (ferritin συκωτιού και σπληνών). (1) Ferritin τείνει να διαμορφώσει oligomers, και όταν είναι παρούσα υπερβολική στα κύτταρα των οργάνων αποθήκευσης υπάρχει μια τάση για τη συμπύκνωση ημικρυστάλλινο hemosiderin να εμφανιστεί στα λυσοσώματα. Τουλάχιστον 20 isoferritins μπορούν να διακριθούν με την ενίσχυση της ισοηλεκτρικής εστίασης. (2) αυτό το microheterogeneity οφείλεται στις διαφορές στο περιεχόμενο του όξινου Χ και αδύναμα των βασικών υπομονάδων Λ. Τα βασικά isoferritins είναι αρμόδια για τη μακροπρόθεσμη λειτουργία αποθήκευσης σιδήρου, και βρίσκονται κυρίως στο συκώτι, τη σπλήνα, και το μυελό των οστών. (1, 3) τα όξινα isoferritins βρίσκονται κυρίως myocardium, τον πλακούντα, και τον ιστό όγκων. Έχουν μια χαμηλότερες περιεκτικότητα σε και πιθανώς μια λειτουργία σίδηρο ως μεσάζοντες για τη μεταφορά του σιδήρου στις διάφορες συνθέσεις (4, 5, 6) Ο προσδιορισμός ferritin είναι μια κατάλληλη μέθοδος για την κατάσταση μεταβολισμού σιδήρου. Ο προσδιορισμός ferritin στην αρχή της θεραπείας παρέχει ένα αντιπροσωπευτικό μέτρο των επιφυλάξεων σιδήρου του σώματος. Μια ανεπάρκεια αποθήκευσης στο reticulo-endothelial σύστημα (RES) μπορεί να ανιχνευθεί σε ένα πολύ νωρίς στάδιο (7) κλινικά, μια αξία κατώτατων ορίων 20 μg/L (ng/mL) έχει αποδειχθεί χρήσιμη στην ανίχνευση της prelatent ανεπάρκειας σιδήρου. Αυτή η αξία παρέχει μια αξιόπιστη ένδειξη της εξαγωγής των επιφυλάξεων σιδήρου που μπορούν να κινητοποιηθούν για τη σύνθεση αιμογλοβίνης. Η λανθάνουσα ανεπάρκεια σιδήρου ορίζεται ως μια πτώση κάτω από το ferritin 12 μg/L (ng/mL) κατώτατο όριο. Αυτές οι δύο τιμές δεν απαιτούν καμία περαιτέρω εργαστηριακή διευκρίνιση, ακόμα και όταν η εικόνα αίματος είναι ακόμα μορφολογικά κανονική. Εάν το καταθλιπτικό ferritin επίπεδο συνοδεύεται από την υποχρωμική, microcytal αναιμία, κατόπιν η προφανής ανεπάρκεια σιδήρου είναι παρούσα. (1) όταν το ferritin επίπεδο ανυψώνεται και η δυνατότητα μιας αναταραχής διανομής μπορεί να αποκλειστεί, αυτό είναι μια εκδήλωση της υπερφόρτωσης σιδήρου στο σώμα. (ng/mL) ferritin 400 μg/L χρησιμοποιείται ως αξία κατώτατων ορίων.
Οι ανυψωμένες ferritin τιμές αντιμετωπίζονται επίσης με τους ακόλουθους όγκους: οξεία λευχαιμία, ασθένεια Hodgkin και καρκίνωμα του πνεύμονα, της άνω και κάτω τελείας, του συκωτιού και του προστάτη.
Ο προσδιορισμός ferritin έχει αποδειχθεί αξίας στη μετάσταση συκωτιού. Οι μελέτες δείχνουν ότι 76% όλων των ασθενών με τη μετάσταση συκωτιού έχουν ferritin τις τιμές επάνω από 400 μg/L (ng/mL). Οι λόγοι για τις ανυψωμένες τιμές θα μπορούσαν να είναι νέκρωση κυττάρων, εμπόδισαν την ερυθροποίηση ή αύξησαν τη σύνθεση στον ιστό όγκων. Δύο μονοκλονικά αντισώματα ποντικιών - μ-4,184 και μ-3,170 - χρησιμοποιούνται για να διαμορφώσουν το σάντουιτς σύνθετο στη δοκιμή.

Αντιδραστήρια
Υλικά παρεχόμενα

• Ντυμένο Microplate, 8 λουρίδες της X12, 96 φρεάτια, που καλύπτονται προηγουμένως με το αντι-ferritin ποντικιών.
• Διακριβωτές, 6 φιαλίδια, 1 μιλ. κάθε, έτοιμο να χρησιμοποιήσει Συγκεντρώσεις: 0 (Α), 20 (Β), 50 (Γ), 100 (Δ), 300 (Ε) ΚΑΙ 600 NG/ML (Φ).
• Ενζυμική κλίση, 1 φιαλίδιο, 11 μιλ. του επονομαζόμενου ποντικιού HRP (peroxidase χρένου) μονοκλονικό αντι-ferritin.
• Υπόστρωμα, 1 φιαλίδιο, 11ml, έτοιμο να χρησιμοποιήσει, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Λύση στάσεων, 1 φιαλίδιο, 6,0 μιλ. 1 θειικού οξέος mol/l.
• Συμπύκνωση λύσης πλυσίματος, 1 φιαλίδιο, 25 μιλ. (40X που συγκεντρώνεται), λύση πλυσίματος PBS-Tween.
• IFU, 1 αντίγραφο.
• Καπάκι πιάτων: 1 κομμάτι.

Υλικά που απαιτούνται (αλλά παρεχόμενος)

• Αναγνώστης Microplate με την απορροφητική ικανότητα μήκους κύματος 450nm και 620nm.
• Πλυντήριο Microplate.
• Επωαστήρας.
• Δονητής πιάτων.
• Micropipettes και πολυδιαυλικά micropipettes που παραδίδουν 50μl με μια ακρίβεια καλύτερα από 1,5%.
• Απορροφητικό έγγραφο.
• Αποσταγμένο νερό.