FT3 εξάρτηση δοκιμής της Elisa 110 ελεύθερη εξέταση αίματος Triiodothyronine T3 λεπτών ελεύθερη

FT3
FT3 ΕΞΑΡΤΗΣΗ ΔΟΚΙΜΗΣ ΤΗΣ ELISA

Ελεύθερο Triiodothyronine 96 δοκιμές

1. Προοριζόμενη χρήση
Immunoassay για το τεχνητό ποσοτικό προσδιορισμό του ελεύθερου triiodothyronine στον ανθρώπινο ορό.

2. Περίληψη

• Το Triiodothyronine είναι μια από τις ορμόνες θυροειδή παρούσες στον ορό που ρυθμίζει το μεταβολισμό. Ο προσδιορισμός αυτής της συγκέντρωσης ορμονών είναι σημαντικός για τη διαγνωστική διαφοροποίηση euthyroid, του hyperthyroid, και των hypothyroid κρατών. Το σημαντικότερο μέρος του συνολικού triiodothyronine είναι συνδεδεμένο στις πρωτεΐνες μεταφορών (TBG, prealbumin, λευκωματίνη).
• Το ελεύθερο triiodothyronine (fT3) είναι η φυσιολογικά ενεργός μορφή του triiodothyronine ορμονών θυροειδή (T3).
• Ο προσδιορισμός ελεύθερου T3 έχει το πλεονέκτημα ανεξάρτητος από τις αλλαγές στις συγκεντρώσεις και τις δεσμευτικές ιδιότητες των δεσμευτικών πρωτεϊνών ο πρόσθετος προσδιορισμός μιας δεσμευτικής παραμέτρου (τ-λήψη, TBG) είναι επομένως περιττός. Στην κανονική λειτουργία θυροειδή, ως συγκεντρώσεις του μεταφορέα οι πρωτεΐνες αλλάζουν, οι συνολικές αλλαγές επιπέδων T3 έτσι ώστε η FT3 συγκέντρωση παραμένει σταθερή.
• Κατά συνέπεια, οι μετρήσεις FT3 των συγκεντρώσεων συσχετίζουν σοβαρότερα με την κλινική θέση από τα συνολικά επίπεδα T3.
• ή το παράδειγμα, η αύξηση στα συνολικά επίπεδα T3 που συνδέονται με την εγκυμοσύνη, τα στοματικά αντισυλληπτικά και η θεραπεία οιστρογόνου οδηγούν στα πιό υψηλά συνολικά επίπεδα T3 ενώ το FT3 con- centration παραμένει βασικά αμετάβλητο.  Επιπλέον, έχει διαπιστωθεί ότι η μέση FT3 αξία έχει μια κλίση που μειώνεται από νέο σε παλαιότερο.
 
• Αντιδραστήρια

3. Υλικά παρεχόμενα
• Ντυμένο Microplate, 8 λουρίδες της X12, 96 φρεάτια, που καλύπτονται προηγουμένως με T3 derivant.
• Διακριβωτές, 6 φιαλίδια, 1 μιλ. κάθε, έτοιμο να χρησιμοποιήσει Συγκεντρώσεις: 0 (Α), 2 (Β), 5 (Γ), 10 (Δ), 20 (Ε) ΚΑΙ 50 PMOL/L. (Φ).
• Ενζυμική κλίση, 1 φιαλίδιο, 6,0 μιλ. των επονομαζόμενων προβάτων HRP (peroxidase χρένου) μονοκλονικό αντι-T3 στον απομονωτή tris-ΝαCl που περιέχει BSA (λευκωματίνη βοοειδών ορών). Περιέχει 0,2% συντηρητικό ProClin300.
• Υπόστρωμα, 1 φιαλίδιο, 11ml, έτοιμο να χρησιμοποιήσει, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Λύση στάσεων, 1 φιαλίδιο, 6,0 μιλ. 1 θειικού οξέος mol/l.
• Συμπύκνωση λύσης πλυσίματος, 1 φιαλίδιο, 25 μιλ. (40X που συγκεντρώνεται), λύση πλυσίματος PBS-Tween.
• IFU, 1 αντίγραφο.
• Καπάκι πιάτων: 1 κομμάτι.

Υλικά που απαιτούνται (αλλά παρεχόμενος)
• Αναγνώστης Microplate με την απορροφητική ικανότητα μήκους κύματος 450nm και 620nm.
• Πλυντήριο Microplate.
• Επωαστήρας.
• Δονητής πιάτων.
• Micropipettes και πολυδιαυλικά micropipettes που παραδίδουν 50μl με μια ακρίβεια καλύτερα από 1,5%.
• Απορροφητικό έγγραφο.
• Αποσταγμένο νερό.

4. Προϊόντα δοκιμής

Εξασφαλίστε τα δείγματα των ασθενών, διακριβωτές, και οι έλεγχοι είναι στην περιβαλλοντική θερμοκρασία (18-25 ℃) πριν από τη μέτρηση. Αναμίξτε όλα τα αντιδραστήρια μέσω ήπια να αναστρέψει πριν από τη χρήση.

• Η χρήση μόνο ο αριθμός φρεατίων απαίτησε και σχηματοποιεί τα φρεάτια των microplates για κάθε διακριβωτή και δείγμα που δοκιμάζονται. • Προσθέστε 50 µL των διακριβωτών ή των δειγμάτων σε κάθε ένα καλά.

• Προσθέστε 50 µL της ενζυμικής κλίσης σε κάθε μια καλά.

• Τινάξτε το microplate ήπια για 30 δευτερόλεπτα που αναμιγνύουν.

• Καλύψτε το πιάτο με ένα καπάκι πιάτων και επωάστε σε 37 ℃ για 60 λεπτά.

• Απορρίψτε το περιεχόμενο του πιάτου μικροϋπολογιστών από τη μετάγγιση ή τη φιλοδοξία. Εάν μεταγγίζοντας, τρυπήστε και λεκιάστε το πιάτο ξηρό με το απορροφητικό έγγραφο.

• Προσθέστε 350 µL της λύσης πλυσίματος, μεταγγίστε (βρύση και λεκές) ή απορροφήστε. Επαναλάβετε 4 πρόσθετες φορές για συνολικά 5 πλυσίματα. Ένα αυτοματοποιημένο microplate πλυντήριο λουρίδων μπορεί να χρησιμοποιηθεί. Στο τέλος της πλύσης, αναστρέψτε το πιάτο και τρυπήστε έξω οποιαδήποτε υπόλοιπη λύση πλυσίματος επάνω στο απορροφητικό έγγραφο. • Προσθέστε 100 µL του υποστρώματος σε κάθε ένα καλά.

• Η κάλυψη και επωάζει στην περιβαλλοντική θερμοκρασία (18-25℃) στο σκοτάδι για την αντίδραση για 20 λεπτά. Μην τινάξτε το πιάτο μετά από την προσθήκη υποκράτους. • Προσθέστε 50 µL της λύσης στάσεων σε κάθε μια καλά.

• Κούνημα για 15-20 δευτερόλεπτα για να αναμίξουν το υγρό μέσα στα φρεάτια. Είναι σημαντικό να εξασφαλιστεί ότι το μπλε χρώμα αλλάζει σε κίτρινο εντελώς. • Διαβάστε την απορροφητικότητα κάθε μια καλά σε 450 NM (που χρησιμοποιούν 620 έως 630 NM ως μήκος κύματος αναφοράς για να ελαχιστοποιήσει καλά τις ατέλειες) σε έναν αναγνώστη πιάτων μικροϋπολογιστών. Τα αποτελέσματα πρέπει να διαβαστούν μέσα σε 30 λεπτά από την προσθήκη της λύσης στάσεων.