Thyroxine T4 Elisa του ISO ελεύθερη T4 δοκιμή ορών δοκιμής 110 λεπτά που διαβάζονται το χρόνο

T4 Thyroxine
REF: Δοκιμές DS177703 96

1. Προοριζόμενη χρήση
Immunoassay για το τεχνητό ποσοτικό προσδιορισμό thyroxine στον ανθρώπινο ορό.

2. Περίληψη
Thyroxine ορμονών (T4) είναι το κύριο προϊόν που εκκρίνεται από το θυροειδή αδένα και είναι ένα ακέραιο συστατικό του υποθάλαμος-προηγούμενου ρυθμίζοντας συστήματος βλεννογόνος-θυροειδή. Έχει τη λειτουργία anabolically να επηρεάσει το μεταβολισμό. Thyroxine διαμορφώνεται σε μια αντίδραση συζεύξεων από δύο μόρια DIT (3,5-diiodotyrosine) στο θυροειδή αδένα. Αποθηκεύεται συνδεδεμένος στη θυρεοσφαιρίνη στο lumina των θυλακίων θυροειδή και είναι εκκριμένο όπως απαιτείται υπό την επήρεια TSH. (1, 2) το σημαντικό μέρος (> 99%) συνολικό thyroxine (T4) στον ορό είναι παρόν στην πρωτεΐνη; συνδεδεμένη μορφή. Δεδομένου ότι οι συγκεντρώσεις των πρωτεϊνών μεταφορών στον ορό υπόκεινται στα εξωγενή και ενδογενή αποτελέσματα, η θέση των δεσμευτικών πρωτεϊνών πρέπει επίσης να ληφθεί υπόψη στην αξιολόγηση της συγκέντρωσης ορμονών θυροειδή στον ορό. Εάν αυτό αγνοείται, αλλάζει στις δεσμευτικές πρωτεΐνες (π.χ. λόγω του οιστρογόνου; ο περιορισμός των προετοιμασιών, κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης ή παρουσία ενός nephrotic συνδρόμου κ.λπ.) μπορεί να οδηγήσει στις λανθασμένες αξιολογήσεις του μεταβολικού κράτους θυροειδή. (3, 4, 5, 6, 7) ο προσδιορισμός T4 μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τις ακόλουθες ενδείξεις: η ανίχνευση hyperthyroidism, η ανίχνευση αρχικό και δευτεροβάθμιο hypothyroidism, και ο έλεγχος της θεραπείας TSH-καταστολής. (8)
Η δοκιμή T4 υιοθετεί μια ανταγωνιστική αρχή δοκιμής με ένα αντίσωμα που κατευθύνεται συγκεκριμένα ενάντια σε T4. Ενδογενές T4, που απελευθερώνεται από τη δράση του σουλφονικού οξέος anilino-1-ναφθαλίνης 8 (ANS).

3. Υλικά αντιδραστηρίων παρεχόμενα
• Ντυμένο Microplate, 8 λουρίδες της X12, 96 φρεάτια, που καλύπτονται προηγουμένως με T4 derivant.
• Διακριβωτές, 6 φιαλίδια, 1 μιλ. κάθε, έτοιμο να χρησιμοποιήσει Συγκεντρώσεις: 0 (Α), 2,5 (Β), 5 (Γ), 10 (Δ), 15 (Ε) ΚΑΙ 30 ΜG/DL (Φ).
• Ενζυμική κλίση, 1 φιαλίδιο, 6,0 μιλ. του επονομαζόμενου ποντικιού HRP (peroxidase χρένου) μονοκλονικό T4 στον απομονωτή tris-ΝαCl που περιέχει BSA (λευκωματίνη βοοειδών ορών). Περιέχει 0,2% συντηρητικό ProClin300. ANS 1,5 mg/$l*ml.
• Υπόστρωμα, 1 φιαλίδιο, 11ml, έτοιμο να χρησιμοποιήσει, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Λύση στάσεων, 1 φιαλίδιο, 6,0 μιλ. 1 θειικού οξέος mol/l.
• Συμπύκνωση λύσης πλυσίματος, 1 φιαλίδιο, 25 μιλ. (40X που συγκεντρώνεται), λύση πλυσίματος PBS-Tween.
• IFU, 1 αντίγραφο.
• Καπάκι πιάτων: 1 κομμάτι.

4. Υλικά που απαιτούνται (αλλά παρεχόμενος)
• Αναγνώστης Microplate με την απορροφητική ικανότητα μήκους κύματος 450nm και 620nm.
• Πλυντήριο Microplate.
• Επωαστήρας.
• Δονητής πιάτων.
• Micropipettes και πολυδιαυλικά micropipettes που παραδίδουν 50μl με μια ακρίβεια καλύτερα από 1,5%.
• Απορροφητικό έγγραφο.
• Αποσταγμένο νερό

Διαδικασία δοκιμής

Εξασφαλίστε τα δείγματα των ασθενών, διακριβωτές, και οι έλεγχοι είναι στην περιβαλλοντική θερμοκρασία (18-25 ℃) πριν από τη μέτρηση. Αναμίξτε όλα τα αντιδραστήρια μέσω ήπια να αναστρέψει πριν από τη χρήση.

• Η χρήση μόνο ο αριθμός φρεατίων απαίτησε και σχηματοποιεί τα φρεάτια των microplates για κάθε διακριβωτή και δείγμα που δοκιμάζονται. • Προσθέστε 50 µL των διακριβωτών ή των δειγμάτων σε κάθε ένα καλά.

• Προσθέστε 50 µL της ενζυμικής κλίσης σε κάθε μια καλά.

• Τινάξτε το microplate ήπια για 30 δευτερόλεπτα που αναμιγνύουν.

• Καλύψτε το πιάτο με ένα καπάκι πιάτων και επωάστε σε 37 ℃ για 60 λεπτά.

• Απορρίψτε το περιεχόμενο του πιάτου μικροϋπολογιστών από τη μετάγγιση ή τη φιλοδοξία. Εάν μεταγγίζοντας, τρυπήστε και λεκιάστε το πιάτο ξηρό με το απορροφητικό έγγραφο.

• Προσθέστε 350 µl της λύσης πλυσίματος, μεταγγίστε (βρύση και λεκές) ή απορροφήστε. Επαναλάβετε 4 πρόσθετες φορές για συνολικά 5 πλυσίματα. Ένα αυτοματοποιημένο microplate πλυντήριο λουρίδων μπορεί να χρησιμοποιηθεί. Στο τέλος της πλύσης, αναστρέψτε το πιάτο και τρυπήστε έξω οποιαδήποτε υπόλοιπη λύση πλυσίματος επάνω στο απορροφητικό έγγραφο.

• Προσθέστε 100 µL του υποστρώματος σε κάθε ένα καλά.

• Η κάλυψη και επωάζει στην περιβαλλοντική θερμοκρασία (18-25℃) στο σκοτάδι για την αντίδραση για 20 λεπτά. Μην τινάξτε το πιάτο μετά από την προσθήκη υποκράτους. • Προσθέστε 50 µL της λύσης στάσεων σε κάθε μια καλά.

• Κούνημα για 15-20 δευτερόλεπτα για να αναμίξουν το υγρό μέσα στα φρεάτια. Είναι σημαντικό να εξασφαλιστεί ότι το μπλε χρώμα αλλάζει σε κίτρινο εντελώς.

• Διαβάστε την απορροφητικότητα κάθε μια καλά σε 450 NM (που χρησιμοποιούν 620 έως 630 NM ως μήκος κύματος αναφοράς για να ελαχιστοποιήσει καλά τις ατέλειες) σε έναν αναγνώστη πιάτων μικροϋπολογιστών. Τα αποτελέσματα πρέπει να διαβαστούν μέσα σε 30 λεπτά από την προσθήκη της λύσης στάσεων