Ορός εξαρτήσεων δοκιμής HEV IgM Elisa εναντίον του πλάσματος για την ανίχνευση αντισωμάτων

Εξάρτηση Diagnositc για το αντίσωμα IgM στον ιό ηπατίτιδας Ε (ELISA)
Καταχωρήστε το αριθ.: BE402A

1. ΑΡΧΗ

Αυτή η εξάρτηση υιοθετεί τη στερεά φάση, συλλαμβάνει τη μέθοδο της ELISA για την ανίχνευση των αντισωμάτων IgM σε HEV (αντι-HEV) στον ορό ή το πλάσμα με τη σε δύο στάδια διαδικασία επώασης. Το πολυστυρόλιο microwell είναι καλυμμένο προηγουμένως με το καθαρισμένο ενεργοποιημένο μονοκλονικό αντίσωμα IgM ποντικιών αντι ανθρώπινο (αλυσίδα μ). Το HRP έκλινε το ανασυνδυαζόμενο αντιγόνο HEV χρησιμεύει ως ο ανιχνευτής. TMB είναι υπόστρωμα για HRP. Η ενζυμική αντίδραση με το υπόστρωμα TMB παράγει μια αλλαγή χρώματος, και η ένταση της απορροφητικότητας σε 450 NM δείχνει την παρουσία ή την απουσία αντι-HEV αντισωμάτων IgM στο δείγμα. Η δοκιμή είναι συγκεκριμένη, ευαίσθητη, αναπαραγώγιμη και εύκολο να λειτουργηθεί. Είναι για τη διάγνωση της πρόωρης μόλυνσης και της επιδημικής έρευνας.

2. ΥΛΙΚΑ ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ

1. Ντυμένος ο αντιγόνο μικροϋπολογιστής καλύπτει καλά 1 φραγμό (96wells)
2. Diluents δειγμάτων 1 μπουκάλι (12ml)
3. Ένζυμο Conjugant (αντι ανθρώπινο IgM - HRP) 1 μπουκάλι (12ml)
4. Αρνητικός έλεγχος 1 φιαλίδιο (1ml)
5. Θετικός έλεγχος 1 φιαλίδιο (1ml)
6.20 απομονωτής πλυσίματος Χ (διάλυση πριν από τη χρήση) 1 μπουκάλι (30ml)
7. Μπουκάλι υποστρωμάτων Α1 (6ml)
8. Μπουκάλι υποστρωμάτων Β 1 (6ml)
9. Λύση στάσεων (H2SO4 2M) 1 μπουκάλι (6ml)
10. Πλαστική τσάντα 1 τσάντα
11. Έγγραφο σφραγίδων 3 κομμάτια
12. Εγχειρίδιο 1 κάθε

3TEST ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ

1. Φέρτε την εξάρτηση της ELISA για το αντίσωμα IgG στον ιό ηπατίτιδας Ε (όλα τα αντιδραστήρια), και τα δείγματα στη θερμοκρασία δωματίου πριν τη χρήση (περίπου 30 λεπτά).

2. Αραιός συγκεντρωμένος απομονωτής 1:19 πλυσίματος με ddH2O.

3. Για κάθε δοκιμή, θέστε ένα κενό, δύο θετικούς και τρεις αρνητικούς ελέγχους. Προσθέστε το θετικό και αρνητικό ορό ελέγχου 100μl στα θετικά και αρνητικά φρεάτια ελέγχου αντίστοιχα.

4. Προσθέστε diluents δειγμάτων 100μl ο ένας στον άλλο δοκιμή καλά, έπειτα στο δείγμα δοκιμής 10 μl στα φρεάτια δοκιμής. Εισάγετε στο σιφώνιο πάνω-κάτω για να αναμίξετε τα δείγματα καλά.

5. Τα φρεάτια κάλυψης με το έγγραφο σφραγίδων, και επωάζουν έπειτα 30 λεπτά σε 37°C.

6. Απορρίψτε το υγρό σε όλα τα φρεάτια και γεμίστε τα φρεάτια με τη λύση πλυσίματος. Βάλτε κατά μέρος για 15 δευτερόλεπτα, απορρίψτε το υγρό σε όλα τα φρεάτια και γεμίστε τα φρεάτια με τη λύση πλυσίματος. Επαναλάβετε 5 φορές και ξηρά φρεάτια μετά από το τελευταίο πλύσιμο.

7. Προσθέστε 100 μl το ένζυμο Conjugant σε κάθε ένα καλά εκτός από το κενό.

8. Τα φρεάτια κάλυψης με το έγγραφο σφραγίδων, και επωάζουν έπειτα 30 λεπτά σε 37°C.

9. Επαναλάβετε το βήμα 6.

10. Προσθέστε το υπόστρωμα Α και Β 50μl αντίστοιχα σε κάθε ένα καλά συμπεριλαμβανομένου του κενού καλά. Το μίγμα ήπια, που προστατεύεται από το φως και επωάζει 15 λεπτά σε 37°C.

11. Προσθέστε 50μl της λύσης στάσεων σε κάθε μια για να σταματήσετε καλά την αντίδραση, συμπεριλαμβανομένου του κενού καλά.

12. Μετρήστε την απορροφητικότητα σε 450 NM κατά του κενού, ή μετρήστε την απορροφητικότητα σε 450 nm/630-690 NM.