Ανθρώπινη Igg Elisa εξάρτηση HEV διαγνωστική για το αντίσωμα IgG στον ιό ηπατίτιδας Ε

Άνθρωπος υψηλός - ποιοτική HEV IgG Elisa εξάρτηση 96Test/Kit

Εξάρτηση Diagnositc για το αντίσωμα IgG στον ιό ηπατίτιδας Ε (ELISA)
Καταχωρήστε το αριθ.: BE401A

1. ΑΡΧΗ

Αυτή η εξάρτηση χρησιμοποιεί τη στερεά φάση, την έμμεση μέθοδο της ELISA για την ανίχνευση των αντισωμάτων IgG σε HEV (αντι-HEV) στον ορό ή το πλάσμα με τη σε δύο στάδια διαδικασία επώασης. Το πολυστυρόλιο microwell είναι καλυμμένο προηγουμένως με το καθαρισμένο ενεργοποιημένο ανασυνδυαζόμενο αντιγόνο HEV. Το HRP έκλινε το ποντίκι αντι ανθρώπινο IgG (αλυσίδα ρ) μονοκλονικό αντίσωμα χρησιμεύει ως ο ανιχνευτής. TMB είναι υπόστρωμα για HRP. Η ενζυμική αντίδραση με το υπόστρωμα TMB παράγει μια αλλαγή χρώματος, και η ένταση της απορροφητικότητας σε 450 NM δείχνει την παρουσία ή την απουσία αντι-HEV αντισωμάτων IgM στο δείγμα. Η δοκιμή είναι συγκεκριμένη, ευαίσθητη, αναπαραγώγιμη και εύκολο να λειτουργηθεί. Είναι για την οθόνη αίματος της μόλυνσης HEV.

2. ΥΛΙΚΑ ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ

1. Ντυμένο αντιγόνο πιάτο 1 Microwell φραγμός (96wells)
2. Diluent δειγμάτων 1 μπουκάλι (12ml)
3. Αρνητικός έλεγχος 1 φιαλίδιο (1ml)
4. Θετικός έλεγχος 1 φιαλίδιο (1ml)
5.20 απομονωτής πλυσίματος Χ (διάλυση πριν από τη χρήση) 1 μπουκάλι (30ml)
6.Enzyme Conjugant (αντι ανθρώπινο IgG - HRP) 1 μπουκάλι (12ml)
7. Μπουκάλι υποστρωμάτων Α1 (6ml)
8. Μπουκάλι υποστρωμάτων Β 1 (6ml)
9. Λύση στάσεων (H2SO4 2M) 1 μπουκάλι (6ml)
10. Πλαστική τσάντα 1 τσάντα
11. Έγγραφο σφραγίδων 3 κομμάτια
12. Εγχειρίδιο 1 κάθε

ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΔΟΚΙΜΗΣ

1. Φέρτε την εξάρτηση της ELISA για το αντίσωμα IgG στον ιό ηπατίτιδας Ε (όλα τα αντιδραστήρια), και τα δείγματα στη θερμοκρασία δωματίου πριν τη χρήση (περίπου 30 λεπτά).

2. Αραιός συγκεντρωμένος απομονωτής 1:19 πλυσίματος με ddH2O.

3. Για κάθε δοκιμή, θέστε ένα κενό, δύο θετικούς και τρεις αρνητικούς ελέγχους. Προσθέστε το θετικό και αρνητικό ορό ελέγχου 100μl στα θετικά και αρνητικά φρεάτια ελέγχου αντίστοιχα.

4. Προσθέστε diluent δειγμάτων 100 μl ο ένας στον άλλο φρεάτια δοκιμής, έπειτα στον ορό δοκιμής 10 μl στα φρεάτια δοκιμής. Εισάγετε στο σιφώνιο πάνω-κάτω για να αναμίξετε τα δείγματα καλά.

5. Τα φρεάτια κάλυψης με το έγγραφο σφραγίδων, επωάζουν έπειτα 30 λεπτά σε 37°C.

6. Απορρίψτε το υγρό σε όλα τα φρεάτια και γεμίστε τα φρεάτια με τη λύση πλυσίματος. Βάλτε κατά μέρος για 15 δευτερόλεπτα, απορρίψτε το υγρό σε όλα τα φρεάτια και γεμίστε τα φρεάτια με τη λύση πλυσίματος. Επαναλάβετε 5 φορές και ξηρά φρεάτια μετά από το τελευταίο πλύσιμο.

7. Προσθέστε 100 μl το ένζυμο Conjugant σε κάθε ένα καλά εκτός από το κενό.

8. Τα φρεάτια κάλυψης με το έγγραφο σφραγίδων, επωάζουν έπειτα 30 λεπτά σε 37°C.

9. Επαναλάβετε το βήμα 6.

10. Προσθέστε το υπόστρωμα Α και Β 50μl αντίστοιχα σε κάθε ένα καλά συμπεριλαμβανομένου του κενού καλά. Το μίγμα ήπια, που προστατεύεται από το φως και επωάζει 15 λεπτά σε 37°C.

11. Προσθέστε 50μl της λύσης στάσεων σε κάθε μια για να σταματήσετε καλά την αντίδραση, συμπεριλαμβανομένου του κενού καλά.

12. Μετρήστε την απορροφητικότητα σε 450 NM κατά του κενού, ή μετρήστε την απορροφητικότητα σε 450 nm/630-690 NM.