Διαγνωστική εξάρτηση αντισωμάτων εξαρτήσεων HAV IgG Elisa για την ηπατίτιδα ένας ιός

Εξάρτηση Diagnositc για το αντίσωμα IgG στην ηπατίτιδα ένας ιός (ELISA)
Καταχωρήστε το αριθ.: BE302A

1. ΑΡΧΗ

Αυτή η εξάρτηση χρησιμοποιεί τη στερεά φάση, την έμμεση μέθοδο της ELISA για την ανίχνευση των αντισωμάτων IgG σε HAV (αντι-HAV) στον ορό ή το πλάσμα με τη σε δύο στάδια διαδικασία επώασης. Ο μικροϋπολογιστής πολυστυρολίου είναι καλά καλυμμένος προηγουμένως με το καθαρισμένο φυσικό αντιγόνο HAV. Το HRP έκλινε το ποντίκι αντι ανθρώπινο IgG (αλυσίδα ρ) μονοκλονικό αντίσωμα χρησιμεύει ως ο ανιχνευτής. TMB είναι υπόστρωμα για HRP. Η ενζυμική αντίδραση με το υπόστρωμα TMB παράγει μια αλλαγή χρώματος, και η ένταση της απορροφητικότητας σε 450 NM δείχνει την παρουσία ή την απουσία αντι-HAV αντισωμάτων IgG στο δείγμα. Η δοκιμή είναι συγκεκριμένη, ευαίσθητη, αναπαραγώγιμη και εύκολο να λειτουργηθεί. Είναι για την οθόνη αίματος της μόλυνσης HAV.

2. ΥΛΙΚΑ ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ

ντυμένο 1.Antigen πιάτο 1 Microwell φραγμός (96wells)
2.Negative έλεγχος 1 φιαλίδιο (1ml)
3.Positive έλεγχος 1 φιαλίδιο (1ml)
4.20 απομονωτής πλυσίματος Χ (διάλυση πριν από τη χρήση) 1 μπουκάλι (30ml)
5.Enzyme Conjugant (αντι ανθρώπινο IgG - HRP) 1 μπουκάλι (12ml)
6.Substrate μπουκάλι Α1 (6ml)
7.Substrate μπουκάλι Β 1 (6ml)
8.Stop λύση (H2SO4 2M) 1 μπουκάλι (6ml)
9.Plastic τσάντα 1 τσάντα
10.Seal έγγραφο 3 κομμάτια
11.Manual 1 κάθε

3. ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΔΟΚΙΜΗΣ

1. Φέρτε στην εξάρτηση της ELISA για το αντίσωμα IgG στην ηπατίτιδα έναν ιό (όλα τα αντιδραστήρια), και στα δείγματα στη θερμοκρασία δωματίου πριν τη χρήση (περίπου 30 λεπτά).

2. Για κάθε δοκιμή, θέστε ένα κενό, δύο θετικούς και τρεις αρνητικούς ελέγχους. Προσθέστε το θετικό και αρνητικό ορό ελέγχου 100μl στα θετικά και αρνητικά φρεάτια ελέγχου αντίστοιχα.

3. Προσθέστε τον ορό 50μl ο ένας στον άλλο φρεάτια δοκιμής, εισάγετε στο σιφώνιο πάνω-κάτω για να αναμίξετε τα δείγματα καλά.

4. Τα φρεάτια κάλυψης με το έγγραφο σφραγίδων, επωάζουν έπειτα 30 λεπτά σε 37°C.

5. Απορρίψτε το υγρό σε όλα τα φρεάτια και γεμίστε τα φρεάτια με τη λύση πλυσίματος. Βάλτε κατά μέρος για 15 δευτερόλεπτα, απορρίψτε το υγρό σε όλα τα φρεάτια και γεμίστε τα φρεάτια με τη λύση πλυσίματος. Επαναλάβετε 5 φορές και ξηρά φρεάτια μετά από το τελευταίο πλύσιμο.

6. Προσθέστε 100 μl το ένζυμο Conjugant σε κάθε ένα καλά εκτός από το κενό.

7. Τα φρεάτια κάλυψης με το έγγραφο σφραγίδων, επωάζουν έπειτα 30 λεπτά σε 37°C.

8. Επαναλάβετε το βήμα 6.

9. Προσθέστε το υπόστρωμα Α και Β 50μl αντίστοιχα σε κάθε ένα καλά συμπεριλαμβανομένου του κενού καλά. Το μίγμα ήπια, που προστατεύεται από το φως και επωάζει 15 λεπτά σε 37°C.

10. Προσθέστε 50μl της λύσης στάσεων σε κάθε μια για να σταματήσετε καλά την αντίδραση, συμπεριλαμβανομένου του κενού καλά.

11. Μετρήστε την απορροφητικότητα σε 450 NM κατά του κενού, ή μετρήστε την απορροφητικότητα σε 450 nm/630-690 NM.