Εξάρτηση δοκιμής αντισωμάτων εξαρτήσεων HAV Diagnos δοκιμής IgM 96pcs Elisa πλάσματος

Εξάρτηση 96 HAV IgM Elisa δοκιμή/εξάρτηση

Catolog αριθ.: BE301A

1. ΑΡΧΗ

1. Οι χρήσεις αυτών των εξαρτήσεων συλλαμβάνουν τη μέθοδο της ELISA για να ανιχνεύσουν αντι-HAV IgM. Το καθαρισμένο αντίσωμα IgM ποντικιών αντι-ανθρώπινο (μchain) είναι ντυμένο στη στερεά φάση multi-wells.
2. Ένας συζευγμένος HAV-άργυρος προστίθεται στα ντυμένα φρεάτια μετά από το αραιωμένο δείγμα προστιθέμενο και που επωάζεται. Κατόπιν ο επονομαζόμενος peroxidase HAV-άργυρος χρένου προστίθεται. Εάν HAV-IgM είναι παρόν στο δείγμα, ένα συγκρότημα αντι-μ-αλυσίδα-HAV-IgM – HAV-άργυρος - που ονομάζεται με HRP θα διαμορφώσει.
3. Τα φρεάτια πλυσίματος για να αφαιρέσουν άλλα απεριόριστα τμήματα ορών, επωάζουν με το υπόστρωμα (TMB) για να διαμορφώσουν ένα χρωματισμένο προϊόν, και να μετρήσουν την απορροφητικότητα σε 450nm για να δείξουν την παρουσία ή την απουσία HAV-IgM στο δείγμα.
4. Η δοκιμή είναι ειδική, ευαίσθητη, αναπαραγώγιμη και εύκολο να λειτουργηθεί.

2. ΥΛΙΚΑ ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ

1. Ντυμένο αντι-μ-αλυσίδα πιάτο 1 Microwell φραγμός (96wells)
2. Ένζυμο Conjugant (HAVAg-HRP) 1 μπουκάλι (6ml)
3. Συζευγμένο μπουκάλι HAV-άργυρος 1 (6ml)
4. Αρνητικός ορός 1 ελέγχου φιαλίδιο (1ml)
5. Θετικός ορός 1 ελέγχου φιαλίδιο (1ml)
απομονωτής πλυσίματος 6. 20 Χ (διάλυση πριν από τη χρήση) 1 μπουκάλι (30ml)
7. Μπουκάλι υποστρωμάτων Α1 (6ml)
8. Μπουκάλι υποστρωμάτων Β 1 (6ml)
9. Λύση στάσεων (H2SO4 2M) 1 μπουκάλι (6ml)
10. Πλαστική τσάντα 1 τσάντα
11. Έγγραφο σφραγίδων 3 κομμάτια
12. Εγχειρίδιο 1 κάθε

3. Διαδικασία δοκιμής

1. Φέρτε στην εξάρτηση της ELISA για το αντίσωμα IgM στην ηπατίτιδα έναν ιό (όλα τα αντιδραστήρια), και στα δείγματα στη θερμοκρασία δωματίου πριν τη χρήση (περίπου 30 λεπτά).

2. Αραιός συγκεντρωμένος απομονωτής 1:19 πλυσίματος με ddH2O.

3. Αραιώστε το δείγμα (1:1000) με φυσιολογικό αλατούχο.

4. Για κάθε δοκιμή, θέστε ένα κενό, δύο θετικούς και τρεις αρνητικούς ελέγχους. Προσθέστε το θετικό και αρνητικό ορό ελέγχου 100μl στα θετικά και αρνητικά φρεάτια ελέγχου αντίστοιχα.

5. Προσθέστε αραιωμένο το 100μl δείγμα σε άλλα φρεάτια δοκιμής.

6. Τα φρεάτια κάλυψης με το έγγραφο σφραγίδων, επωάζουν έπειτα 30 λεπτά σε 37°C.

7. Απορρίψτε το υγρό σε όλα τα φρεάτια και γεμίστε τα φρεάτια με τη λύση πλυσίματος. Βάλτε κατά μέρος για 15 δευτερόλεπτα, απορρίψτε το υγρό σε όλα τα φρεάτια και γεμίστε τα φρεάτια με τη λύση πλυσίματος. Επαναλάβετε 5 φορές και ξηρά φρεάτια μετά από το τελευταίο πλύσιμο.

8. Προσθέστε τον συζευγμένο HAV-άργυρο 50 μl σε κάθε ένας καλά εκτός από το κενό.

9. Addμl 50 μl ένζυμο Conjugant σε κάθε ένα καλά εκτός από το κενό

10.Cover τα φρεάτια με το έγγραφο σφραγίδων, επωάζουν έπειτα 30 λεπτά σε 37°C.

11. Επαναλάβετε το βήμα 7.

12.Add 50 μl το υπόστρωμα Α και Β αντίστοιχα σε κάθε ένα καλά, το μίγμα που προστατεύεται ήπια από το φως και επωάζει 15 λεπτά σε 37°C.

13. Προσθέστε 50μl της λύσης στάσεων σε κάθε μια για να σταματήσετε καλά την αντίδραση, συμπεριλαμβανομένου του κενού καλά.

14. Μετρήστε την απορροφητικότητα σε 450 NM κατά του κενού, ή μετρήστε την απορροφητικότητα σε 450 nm/630-690 NM.