Immunosorbent δοκιμής της Elisa εξετάσεων αίματος HBcAb συνδεμένη ένζυμο δοκιμή

Immunosorbent εξαρτήσεων της Elisa HBcAb συνδεμένη ένζυμο δοκιμή Elisa

Εξάρτηση της ELISA HBcAb
Καταχωρήστε το αριθ.: BE105A

1.SUMMARY

1 η ηπατίτιδα Β είναι μια μολυσματική ασθένεια που προκαλείται από τον ιό ηπατίτιδας Β (HBV) που είναι ένας τυλιγμένος, double-stranded ιός DNA που ανήκει στην οικογένεια Hepadnaviridae και αναγνωρίζεται δεδομένου ότι η σημαντικότερη αιτία του αίματος διεβίβασε την ηπατίτιδα μαζί με τον ιό ηπατίτιδας Γ (HCV). HBV εκκρίνεται στα ρευστά σωμάτων όπως το σπέρμα, το σάλιο, το αίμα και τα ούρα στα πρόσωπα με την οξεία ή χρόνια μόλυνση.

2 ο ιός ηπατίτιδας Β είναι γνωστός ως αίμα-αντεγμένος ιός επειδή διαβιβάζεται από ένα άτομο σε άλλο μέσω του αίματος ή τα ρευστά που μολύνονται με το αίμα.

3 μετάδοση των αποτελεσμάτων ιών ηπατίτιδας Β από την έκθεση στα μολυσματικά ρευστά αίματος ή σωμάτων. Όταν HBV εισβάλλει στο σώμα προκαλεί τη ζημία συκωτιού μέσω της επαγωγής auto-immunity.

•  
• 2. ΥΛΙΚΑ ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ

1.Microplate 1 φραγμός (96wells)
2.Negative έλεγχος 1 μιλ. ×1
3.Positive έλεγχος 1 μιλ. ×1
4.Conjugate 6 μιλ. ×1
5.Substrate λύση Α 6 μιλ. ×1
6.Substrate λύση Β 6 μιλ. ×1
7.20×Wash απομονωτής 40 μιλ. ×1
8.Stop λύση 6 μιλ. ×1
9.Plate κάλυψη 3 κομμάτι
10.Insert 1 αντίγραφο

3 ΤΑ ΥΛΙΚΑ ΑΠΑΙΤΗΣΑΝ ΑΛΛΑ ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΟΣ

1. Micropipettes: 0,02, 0,05, 0,10, 0,15, 0,20, και 1,0 μιλ.

2. Μίας χρήσης άκρες σιφωνίων.

3. Αποσταγμένο ή εξιοντισμένο νερό.

4. Υγραμένο κιβώτιο ικανό 37°C

5. Απορροφητική έγγραφο ή πετσέτα εγγράφου.

6. Microtiter πιάτο ή λουρίδα-καλά πλυντήριο

7. Microtiter αναγνώστης πιάτων με το μήκος κύματος 450nm (ή 450 nm/630nm)

8. Χρονόμετρο

ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΔΟΚΙΜΗΣ

1. Φέρτε την εξάρτηση της ELISA (όλα τα αντιδραστήρια), και τα δείγματα στη θερμοκρασία δωματίου πριν τη χρήση (περίπου 30 λεπτά).

2. Ελέγξτε τη συμπύκνωση απομονωτών πλυσίματος για την παρουσία αλατισμένων κρυστάλλων. Εάν τα κρύσταλλα έχουν διαμορφώσει στη λύση, resolubilize με τη θέρμανση σε 37℃ έως ότου διαλύουν τα κρύσταλλα. Αραιώστε το συγκεντρωμένο απομονωτή 1:19 πλυσίματος με το ddH₂Ο. Χρησιμοποιήστεμόνοτακαθαράσκάφηγιανα αραιώσετετοναπομονωτή.

3. Για κάθε δοκιμή, θέστε ένα κενό, δύο θετικούς και δύο αρνητικούς ελέγχους. Προσθέστε το θετικό έλεγχο 50μl, τον αρνητικό έλεγχο, και το δείγμα στα αντίστοιχα φρεάτιά τους. Προσθέστε 50μl της HRP-κλίσης σε κάθε μια καλά εκτός από το κενό και το μίγμα με να τρυπήσει το πιάτο ήπια. Ούτε τα δείγματα ούτε η HRP-κλίση δεν πρέπει να προστεθούν στο κενό καλά.

4. Τα φρεάτια κάλυψης με το έγγραφο σφραγίδων, και τοποθετούν το microtiter πιάτο σε ένα υγραμένο πεδίο και επωάζουν σε 37°C για 30 λεπτά.

5. Απορρίψτε το υγρό σε όλα τα φρεάτια και γεμίστε τα φρεάτια με τη λύση πλυσίματος. Βάλτε κατά μέρος για 15 δευτερόλεπτα, απορρίψτε το υγρό σε όλα τα φρεάτια και γεμίστε τα φρεάτια με τη λύση πλυσίματος. Επαναλάβετε 5 φορές και εμποδίζοντας το πλαίσιο των φρεατίων στα απορροφητικά φρεάτια εγγράφου για λίγα δευτερόλεπτα μετά από το τελευταίο πλύσιμο.

6. Προσθέστε το υπόστρωμα Α και Β 50μl αντίστοιχα σε κάθε ένα καλά συμπεριλαμβανομένου του κενού καλά. Το μίγμα ήπια, που προστατεύεται από το φως και επωάζει 15 λεπτά σε 37°C.

7. Προσθέστε μια πτώση (ul 50) της λύσης στάσεων στο κάθε καλά συμπεριλαμβανομένου του κενού για να σταματήσετε καλά την αντίδραση χρώματος.

8. Διαβάστε την αξία OD σε 450 nm/630 NM με το διπλό αναγνώστη πιάτων φίλτρων. Είναι επιλογή να διαβαστεί η αξία OD σε 450 NM με τον ενιαίο αναγνώστη πιάτων φίλτρων. (Χρησιμοποιώντας την αξία OD του κενού για να διορθώσει καλά όλη την ανάγνωση OD από όλα τα φρεάτια)