ΚΙΤ ΕΛΕΓΧΟΥ ELISA Ανθρώπινης Ιριδίνης

ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ

Αυτό το κιτ επιτρέπει τον προσδιορισμό των συγκεντρώσεων Ιριδίνης σε ανθρώπινο ορό, πλάσμα και άλλα βιολογικά υγρά

Διαδικασία ανάλυσης

1. Αραιώστε και προσθέστε δείγμα: Αραιώστε το αρχικό πρότυπο πυκνότητας ως εξής:

2. προσθέστε δείγμα: Ρυθμίστε ξεχωριστά κενά φρεάτια (τα φρεάτια σύγκρισης κενού δεν προσθέτουν δείγμα και αντιδραστήριο HRP-Conjugate, η λειτουργία κάθε άλλου βήματος είναι η ίδια). φρεάτιο δείγματος δοκιμής. Προσθέστε 50μl προτύπου στην πλάκα Microelisa, προσθέστε 40μl αραίωσης δείγματος στο φρεάτιο δείγματος δοκιμής και, στη συνέχεια, προσθέστε 10μl δείγματος δοκιμής (η τελική αραίωση του δείγματος είναι 5 φορές), προσθέστε δείγμα στα φρεάτια, μην αγγίζετε το τοίχωμα του φρεατίου όσο το δυνατόν περισσότερο και ανακατέψτε απαλά.

3.Επώαση: Αφού κλείσετε την πλάκα με τη μεμβράνη της πλάκας κλεισίματος, επωάστε για 30 λεπτά στους 37℃.

4.Διαμόρφωση υγρού: 30-πλάσια (ή 20-πλάσια) διάλυμα πλύσης αραιωμένο 30-πλάσια (ή 20-πλάσια) με απεσταγμένο νερό και διατηρήστε το.

5.πλύσιμο: Ανοίξτε τη μεμβράνη της πλάκας κλεισίματος, απορρίψτε το υγρό, στεγνώστε με ταλάντευση, προσθέστε ρυθμιστικό πλύσης σε κάθε φρεάτιο, παραμείνετε για 30 δευτερόλεπτα και μετά στραγγίστε, επαναλάβετε 5 φορές, στεγνώστε με χτύπημα.

6.προσθέστε ένζυμο: Προσθέστε 50μl αντιδραστηρίου HRP-Conjugate σε κάθε φρεάτιο, εκτός από το κενό φρεάτιο.

7.επώαση: Λειτουργία με 3.

8.πλύσιμο: Λειτουργία με 5.

9.χρώμα: Προσθέστε 50ul διαλύματος χρωμογόνου Α και 50ul διαλύματος χρωμογόνου Β σε κάθε φρεάτιο, αποφύγετε τη διατήρηση του φωτός για 10 λεπτά στους 37℃

10.Διακόψτε την αντίδραση: Προσθέστε 50μl διαλύματος διακοπής σε κάθε φρεάτιο, Διακόψτε την αντίδραση (το μπλε χρώμα αλλάζει σε κίτρινο χρώμα).

11.ανάλυση: πάρτε το κενό φρεάτιο ως μηδέν, Διαβάστε την απορρόφηση στα 450nm μετά την προσθήκη του διαλύματος διακοπής και εντός 15 λεπτών.

Απαιτήσεις δείγματος

1. εξαγάγετε το συντομότερο δυνατό μετά τη συλλογή του δείγματος και σύμφωνα με τη σχετική βιβλιογραφία και θα πρέπει να γίνει πείραμα το συντομότερο δυνατό μετά την εξαγωγή. Εάν δεν είναι δυνατόν, το δείγμα μπορεί να διατηρηθεί στους -20℃ για διατήρηση, Αποφύγετε τους επαναλαμβανόμενους κύκλους κατάψυξης-απόψυξης.

2, Δεν είναι δυνατή η ανίχνευση του δείγματος που περιέχει NaN3, επειδή το NaN3 αναστέλλει τη δράση HRP.

3. εξαγάγετε το συντομότερο δυνατό μετά τη συλλογή του δείγματος και σύμφωνα με τη σχετική βιβλιογραφία και θα πρέπει να γίνει πείραμα το συντομότερο δυνατό μετά την εξαγωγή. Εάν δεν είναι δυνατόν, το δείγμα μπορεί να διατηρηθεί στους -20℃ για διατήρηση, Αποφύγετε τους επαναλαμβανόμενους κύκλους κατάψυξης-απόψυξης.

4. Δεν είναι δυνατή η ανίχνευση του δείγματος που περιέχει NaN3, επειδή το NaN3 αναστέλλει τη δράση HRP.

Σημαντικές σημειώσεις

• Το κιτ που αφαιρείται από το περιβάλλον ψύξης θα πρέπει να εξισορροπηθεί 15-30 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου, οι πλάκες ELISA που επικαλύπτονται εάν δεν έχουν χρησιμοποιηθεί μετά το άνοιγμα, η πλάκα θα πρέπει να αποθηκεύεται σε σφραγισμένη σακούλα.
• Το ρυθμιστικό πλύσης θα έχει διαχωρισμό κρυστάλλωσης, μπορεί να θερμανθεί το νερό βοηθά στη διάλυση κατά την αραίωση. Το πλύσιμο δεν επηρεάζει το αποτέλεσμα.
• προσθέστε δείγμα με δειγματολήπτη Κάθε βήμα και διορθώστε την ακρίβειά του συχνά, αποφεύγει το πειραματικό σφάλμα. προσθέστε δείγμα εντός 5 λεπτών, εάν ο αριθμός του δείγματος είναι πολύ μεγάλος, συνιστάται η χρήση Volley.
• εάν η περιεκτικότητα του υλικού δοκιμής είναι υπερβολικά υψηλή (Το OD του δείγματος είναι μεγαλύτερο από το πρώτο πρότυπο φρεατίου), παρακαλούμε αραιώστε το δείγμα (n-πλάσιο), παρακαλούμε αραιώστε και πολλαπλασιάστε με τον συντελεστή αραίωσης. (×n×5).
• Η μεμβράνη της πλάκας κλεισίματος περιορίζει μόνο τη χρήση μιας χρήσης, για να αποφευχθεί η διασταυρούμενη μόλυνση.
• Το υπόστρωμα αποφεύγει τη διατήρηση του φωτός.
• Παρακαλούμε σύμφωνα με τις οδηγίες χρήσης αυστηρά, ο προσδιορισμός του αποτελέσματος της δοκιμής πρέπει να λάβει την αναγνώστρια μικροπλακών ως πρότυπο.
• Όλα τα δείγματα, το ρυθμιστικό πλύσης και κάθε είδους απόρριψη θα πρέπει να είναι σύμφωνα με τη διαδικασία μολυσματικού υλικού.
• Μην ανακατεύετε αντιδραστήρια με αυτά από άλλες παρτίδες.