Εξάρτηση βιταμινών D3 Elisa εξαρτήσεων δοκιμής της Elisa VD3 RUO σάντουιτς για την ερευνητική χρήση

Ανθρώπινη βιταμίνη D3 VD3 εξάρτηση της ELISA

• Ημερομηνία λήξης: έξι μήνες.
• Αποθήκευση: 2-8℃.
• Η ανθρώπινη εξάρτηση βιταμινών μας D3 (VD3) ELISA είναι στα επίπεδα βιταμινών D3 δοκιμής (VD3) στον ανθρώπινο ορό, το πλάσμα, τα μέσα πολιτισμού ή οποιοδήποτε βιολογικό ρευστό.

Αρχή

Αυτή η εξάρτηση της ELISA χρησιμοποιεί την σάντουιτς-Elisa ως μέθοδο. Το Microelisa stripplate που παρέχεται σε αυτήν την εξάρτηση έχει καλυφθεί προηγουμένως με ένα αντίσωμα συγκεκριμένο για τη βιταμίνη D3 (VD3). Τα πρότυπα ή τα δείγματα προστίθενται στα κατάλληλα φρεάτια Microelisa stripplate και συνδυάζονται στο συγκεκριμένο αντίσωμα. Κατόπιν Peroxidase χρένου (HRP) - το κλιμένο αντίσωμα συγκεκριμένο για τη βιταμίνη D3 (VD3) προστίθεται σε κάθε Microelisa stripplate καλά και επωάζεται. Τα ελεύθερα συστατικά πλένονται μακριά. Η λύση υποστρωμάτων TMB προστίθεται σε κάθε μια καλά. Μόνο εκείνα τα φρεάτια που περιέχουν τη βιταμίνη D3 (VD3) και κλιμένο το HRP αντίσωμα βιταμινών D3 (VD3) θα εμφανιστούν μπλε στο χρώμα και θα γίνουν έπειτα κίτρινα μετά από την προσθήκη της λύσης στάσεων. Η οπτική πυκνότητα (OD) μετριέται spectrophotometrically σε ένα μήκος κύματος 450 NM. Η αξία OD είναι ανάλογη προς τη συγκέντρωση της βιταμίνης D3 (VD3). Μπορείτε να υπολογίσετε τη συγκέντρωση της βιταμίνης D3 (VD3) στα δείγματα με τη σύγκριση του OD των δειγμάτων με την τυποποιημένη καμπύλη.

Υλικά που παρέχονται την εξάρτηση

• Διάλυση των προτύπων

Δέκα φρεάτια τίθενται για τα πρότυπα σε ένα Microelisa stripplate. Σε καλά 1 και καλά 2, η τυποποιημένη λύση 100μl και ο τυποποιημένος απομονωτής διαλύσεων 50μl προστίθενται και αναμιγνύονται καλά. Σε καλά 3 και καλά 4, η λύση 100μl από καλά 1 και καλά 2 προστίθεται αντίστοιχα. Κατόπιν ο τυποποιημένος απομονωτής διαλύσεων 50μl προστίθεται και αναμιγνύεται καλά. 50μl η λύση απορρίπτεται από καλά 3 και καλά 4. Σε καλά 5 και καλά 6, η λύση 50μl από καλά 3 και καλά 4 προστίθεται αντίστοιχα. Κατόπιν ο τυποποιημένος απομονωτής διαλύσεων 50μl προστίθεται και αναμιγνύεται καλά. Σε καλά 7 και καλά 8, η λύση 50μl από καλά 5 και καλά 6 προστίθεται αντίστοιχα. Κατόπιν ο τυποποιημένος απομονωτής διαλύσεων 50μl προστίθεται και αναμιγνύεται καλά. Σε καλά 9 και καλά 10, η λύση 50μl από καλά 7 και καλά 8 προστίθεται αντίστοιχα. Κατόπιν ο τυποποιημένος απομονωτής διαλύσεων 50μl προστίθεται και αναμιγνύεται καλά. 50μl η λύση απορρίπτεται από καλά 9 και καλά 10. Μετά από τη διάλυση, ο συνολικός όγκος σε όλα τα φρεάτια είναι 50μl και οι συγκεντρώσεις είναι 30 ng/ml, 20 ng/ml, 10 ng/ml, 5 ng/ml και 2,5 ng/ml, αντίστοιχα.

Υπολογισμός των αποτελεσμάτων

  Οι γνωστές συγκεντρώσεις των ανθρώπινων προτύπων και της αντίστοιχης ανάγνωσής της OD βιταμινών D3 (VD3) σχεδιάζονται στην κλίμακα κούτσουρων (Χ-άξονας) και την κλίμακα κούτσουρων (Υ-άξονας) αντίστοιχα. Η συγκέντρωση της ανθρώπινης βιταμίνης D3 (VD3) στο δείγμα καθορίζεται με τη χάραξη του O.D. του δείγματος στον Υ-άξονα. Η αρχική συγκέντρωση υπολογίζεται με τον πολλαπλασιασμό του παράγοντα διαλύσεων.

Ακρίβεια

Ακρίβεια δια--δοκιμής (ακρίβεια μέσα σε μια δοκιμή): 3 δείγματα με τη χαμηλή, μέση και υψηλού επιπέδου ανθρώπινη βιταμίνη D3 (VD3) εξετάστηκαν 20 φορές σε ένα πιάτο, αντίστοιχα.

Ακρίβεια διά-δοκιμής (ακρίβεια μεταξύ των δοκιμών): 3 δείγματα με τη χαμηλή, μέση και υψηλού επιπέδου ανθρώπινη βιταμίνη D3 (VD3) εξετάστηκαν σε 3 διαφορετικά πιάτα, 8 αντιγραφές σε κάθε πιάτο.

Βιογραφικό σημείωμα (%) = SD/meanX100

Δια--δοκιμή: Βιογραφικό σημείωμα<10>

Διά-δοκιμή: Βιογραφικό σημείωμα<12>

Σειρά δοκιμής

0,8 ng/ml -36 ng/ml

Ευαισθησία:

0,3 ng/ml

• Αποθηκεύστε την εξάρτηση σε 4°C επάνω στην παραλαβή. Η εξάρτηση πρέπει να εξισορροπηθεί στη θερμοκρασία δωματίου πριν από τη δοκιμή. Αφαιρέστε οποιεσδήποτε αχρείαστες λουρίδες από το ανθρώπινο αντίσωμα-ντυμένο πιάτο βιταμινών D3 (VD3), τις ξανασφραγίστε zip-lock στο φύλλο αλουμινίου και κρατήστε σε 4°C.
• Η τυποποιημένη καμπύλη πρέπει να περιληφθεί σε κάθε δοκιμή. Τα ξαναδιπλωμένα φρεάτια συστήνονται. Εάν η αξία OD του δείγματος είναι μεγαλύτερη από το πρώτο καλά των προτύπων, παρακαλώ αραιώστε το δείγμα (χρόνοι ν) πριν από τη δοκιμή. Κατά την υπολογισμό της αρχικής συγκέντρωσης βιταμινών D3 (VD3), παρακαλώ πολλαπλασιάστε το συνολικό παράγοντα διαλύσεων (XnX5).