ΚΙΤ Ελέγχου ΕΙΡΙΣΙΝΗΣ ΕΛΙΣΑ για τον άνθρωπο

Σκοπός

Αυτό το κιτ επιτρέπει τον προσδιορισμό των συγκεντρώσεων ιρισίνης στον ανθρώπινο ορό, στο πλάσμα και σε άλλα βιολογικά υγρά.

Διαδικασία αξιολόγησης

1.Αραίωση και προσθήκη δείγματος:Αραίωση Αρχική πυκνότητα Πρότυπο όπως ορίζεται στον ακόλουθο πίνακα:

2.προσθήκη δείγματος:Επιλέξτε ξεχωριστά τα κενά πηγάδια (τα κενά πηγάδια σύγκρισης δεν προσθέτουν δείγμα και αντιδραστήρα HRP-Conjugate, διαφορετικά κάθε στάδιο λειτουργίας είναι το ίδιο).Προσθέστε 50 μl πρότυπου στο Microelisa stripplate, προσθέστε αραιωμένο δείγμα 40μl στο πηγάδι δοκιμής δείγματος, στη συνέχεια προσθέστε δείγμα δοκιμής 10μl (τελική αραιώνονται δείγμα είναι 5 φορές), προσθέστε δείγμα στα πηγάδια, μην αγγίξετε το τοίχωμα του πηγάδι όσο το δυνατόν περισσότερο, και προσεκτικά αναμιγνύεται.

3.Ενσωματώστε: Μετά το κλείσιμο της πλάκας με μεμβράνη της πλάκας κλεισίματος, ενσωματώστε για 30 λεπτά σε θερμοκρασία 37°C.

4.Συγκροτείτε υγρό: 30 φορές (ή 20 φορές) διάλυμα πλύσης αραιωμένο 30 φορές (ή 20 φορές) με αποσταγμένο νερό και αποθεματικό.

5.πλύσιμο:Ανοίξτε την μεμβράνη της πλάκας κλεισίματος, απορρίψτε το υγρό, στεγνώστε το με κούνημα, προσθέστε ταμείο πλύσης σε κάθε πηγάδι, μείνετε ακίνητοι για 30 λεπτά και στη συνέχεια αποστραγγίστε, επαναλάβετε 5 φορές, στεγνώστε με χτύπημα.

6.προστίθεται ένζυμος:προστίθενται 50μl αντιδραστήρα HRP-Conjugate σε κάθε πηγάδι, εκτός από το κενό πηγάδι.

7- Ενεργοποίηση με 3.

8- πλύση: λειτουργία με 5.

9.χρώμα:Προστίθεται διάλυμα χρωμογόνου A 50ul και διάλυμα χρωμογόνου B 50ul σε κάθε πηγάδι, αποφεύγεται η διατήρηση του φωτός για 10 λεπτά στους 37°C

10.Σταματήστε την αντίδραση: Προσθέστε Stop Solution50μl σε κάθε πηγάδι, Σταματήστε την αντίδραση ((το μπλε χρώμα αλλάζει σε κίτρινο χρώμα).

11. δοκιμή: λαμβάνεται κενό πηγάδι σε μηδέν, διαβάζεται η απορρόφηση στα 450 nm μετά την προσθήκη του διαλύματος Stop και εντός 15 λεπτών.

Απαιτήσεις για δείγματα

1.εκχύλισμα το συντομότερο δυνατόν μετά τη συλλογή των δειγμάτων και σύμφωνα με την σχετική βιβλιογραφία, και θα πρέπει να γίνεται το συντομότερο δυνατό μετά την εκχύλιση.το δείγμα μπορεί να διατηρείται σε θερμοκρασία -20 °C για τη διατήρηση, Αποφύγετε επαναλαμβανόμενους κύκλους κατάψυξης- τήξης.

2"Δεν μπορεί να ανιχνευθεί το δείγμα που περιέχει NaN3, επειδή το NaN3 αναστέλλει το ενεργό HRP.

3.εκχύλισμα το συντομότερο δυνατόν μετά τη συλλογή των δειγμάτων και σύμφωνα με την σχετική βιβλιογραφία, και θα πρέπει να γίνεται το συντομότερο δυνατό μετά την εκχύλιση.το δείγμα μπορεί να διατηρείται σε θερμοκρασία -20 °C για τη διατήρηση, Αποφύγετε επαναλαμβανόμενους κύκλους κατάψυξης- τήξης.

4.Δεν μπορεί να ανιχνευθεί το δείγμα που περιέχει NaN3, επειδή το NaN3 αναστέλλει το ενεργό HRP.

Σημαντικές σημειώσεις

• Το κιτ αφαιρείται από το ψυκτικό περιβάλλον και πρέπει να ισορροπείται για 15-30 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου, με τις πλάκες ELISA επικαλυμμένες αν δεν έχουν καταναλωθεί μετά το άνοιγμα.η πλάκα πρέπει να φυλάσσεται σε σφραγισμένη σακούλα.
• Το πλύσιμο του μπουφέρ θα κάνει τον διαχωρισμό κρυστάλλωσης, μπορεί να θερμανθεί το νερό βοηθά να διαλυθεί όταν αραιωθεί. Το πλύσιμο δεν επηρεάζει το αποτέλεσμα.
• προσθέστε δείγμα με δειγματοληπτή Κάθε βήμα, και διόρθωση της ακρίβειας του συχνά, αποφεύγει το πειραματικό λάθος. προσθέστε δείγμα εντός 5 λεπτών, αν ο αριθμός των δειγμάτων είναι πολύ, συνιστούμε να χρησιμοποιήσετε Volley.
• εάν η περιεκτικότητα στο υλικό δοκιμής είναι υπερβολικά υψηλή (Η ΔΔ του δείγματος είναι μεγαλύτερη από το πρώτο τυποποιημένο πηγάδι ), παρακαλούμε αραιώστε το δείγμα (n φορές), παρακαλούμε αραιώστε και πολλαπλασιάστε τον συντελεστή αραιώσεως.(×n×5).
• Η μεμβράνη της πλάκας κλεισίματος περιορίζει μόνο τη χρήση μιας χρήσης, για να αποφευχθεί η διασταυρούμενη μόλυνση.
• Το υπόστρωμα αποφεύγει τη διατήρηση του φωτός.
• Παρακαλούμε ακολουθήστε αυστηρά τις οδηγίες χρήσης.
• Όλα τα δείγματα, το μπουφέρι πλύσης και κάθε είδος απορριμμάτων πρέπει να είναι σύμφωνα με τη διαδικασία του μολυσματικού υλικού.
• Μην αναμειγνύετε αντιδραστήρες με αντιδραστήρες άλλων παρτίδων.