Κίτ Ελίζα

Ενζυμικά συνδεδεμένη ανοσοαπορρόφηση για την ανίχνευση HBsAgσε ορό ή πλάσμα

Η EIA HBsAg είναι μια ταυτόχρονη ανοσολογική δοκιμή sandwich στερεής φάσης, η οποία χρησιμοποιεί μονοκλωνικά αντισώματα και πολυκλωνικά αντισώματα ειδικά για την HBsAg.Τα μικροτίτρια είναι καλυμμένα με μονοκλωνικά αντισώματα ειδικά για την HBsAg.Ένα δείγμα ορού προστίθεται στις μικροτρίτες που έχουν επικαλυφθεί με αντισώματα μαζί με πολυκλωνικά αντισώματα που έχουν συνδυαστεί με ένζυμα.Στη συνέχεια, το πιάτο πλένεται για να αφαιρεθεί το ελεύθερο υλικόΤελικά, ένα διάλυμα υποστρώματος προστίθεται στα πηγάδια και εκκολάπτεται. The enzyme-substrate reaction can be stopped and the result is visualized by naked eye or read by EIA plate reader for absorbance at the wavelength of 450 nm(450 nm/630 nm) and is proportional to the amount of antibodies present in the specimen- Τι;

Υλικά που παρέχονται με τα κιτ:

ΕΠΙΤΡΟΠΗ ΑΠΟΤΑΣΗΣ:

Συνιστάται να αναλύεται κάθε δείγμα και κάθε δείγμα ελέγχου σε διπλό αντίγραφο.

1. Δίνετε μία σταγόνα (50μl) θετικού ελέγχου και αρνητικού ελέγχου σε διπλό αντίγραφο στα αντίστοιχα πηγάδια.και 50ul δειγμάτων ορού ή πλάσματος σε αντίστοιχες δοκιμαστικές πηγάδες.
2. Προσθέστε μία σταγόνα (50μl) Enzyme Conjugate σε κάθε πηγάδι.Μην προσθέτετε το Enzyme Conjugate στο κενό πηγάδι.
3. Τοποθετήστε τις πλάκες μικροτίτρου σε ένα ενυδατωμένο κουτί και επώαση σε θερμοκρασία 37°C για 30 λεπτά.
4. Πλύνετε κάθε πηγάδι 5 φορές γεμίζοντας κάθε πηγάδι με αραιωμένο αδιάβροχο πλύσης, στη συνέχεια αντιστρέψτε το πιάτο με δύναμη για να απορροφήσει όλο το νερό και κλείστε το χείλος των πηγών σε απορροφητικό χαρτί για λίγα δευτερόλεπτα.
5. Προσθέστε μία σταγόνα (50μl) διαλύματος υποστρώματος Α (HRP-substrate) σε κάθε πηγάδι, στη συνέχεια προσθέστε μία σταγόνα (50μl) διαλύματος υποστρώματος Β (TMB) σε κάθε πηγάδι.
6. Προσθέστε 1 σταγόνα (50μl) διαλύματος Stop σε κάθε πηγάδι για να σταματήσετε την αντίδραση χρώματος.Η ανάγνωση της τιμής OD σε 450 nm είναι προαιρετική με αναγνώστη πλακέτας ενός φίλτρου.. (χρησιμοποιώντας την τιμή OD του κενού πηγάδι για τη διόρθωση όλων των ενδείξεων OD από όλα τα πηγάδια)