Κίτ Ελίζα

Ο σκοπός της δοκιμής ELISA RUO HBcAb είναι η ποιοτική ανίχνευση αντισωμάτων στο αντιγόνο του πυρήνα του ιού της ηπατίτιδας Β στον ανθρώπινο ορό/πλασμα.

Ως μέρος της οικογένειας Hepadnaviridae, ο ιός HBV είναι ένας περιτυλιγμένος, διπλής ράχνης ιός DNA που είναι η κύρια αιτία μετάδοσης της ηπατίτιδας μέσω του αίματος.Οι επιπτώσεις της λοίμωξης από τον ιό HBV κυμαίνονται από ήπια έως σοβαρή ηπατίτιδαΓια να ταξινομηθεί η λοίμωξη από ηπατίτιδα Β, η λοίμωξη με ηπατίτιδα Β πρέπει να είναιοι ορολογικοί δείκτες πρέπει να προσδιορίζονται κατά τη διάρκεια των τριών σταδίων της μόλυνσης - επώασηςΤο κύριο συστατικό του ιού είναι το αντιγόνο πυρήνα της ηπατίτιδας Β (HBcAg).Αυτό το αντιγόνο του πυρήνα αποτελείται από ένα μονοπλεπτίδιο περίπου 17kD που απελευθερώνεται κατά τη διάσπαση των σωματιδίων του πυρήνα.. Τουλάχιστον ένας ανοσολογικός καθοριστικός παράγοντας είναι παρών στο αντιγόνο. Λίγο μετά την έναρξη της HBsAg, εμφανίζονται αντισώματα κατά της HBcAg (συνολικά αντισώματα και IgM κατά της HBc) και δεν εξαφανίζονται ποτέ.,Η λοίμωξη από ηπατίτιδα Β μπορεί να προσβληθεί χωρίς ανοσολογικά ανιχνεύσιμα αντι- HBc.Η ανίχνευση για αντι-HBc παρέχει δεδομένα σχετικά με το επιπολασμό της ηπατίτιδας Β σε διάφορους πληθυσμούςΑυτό οφείλεται στο γεγονός ότι η αντι-HBc είναι ένας δείκτης οξείας, χρόνιας ή επιλυμένης μόλυνσης από τον ιό HBV. Ο προσδιορισμός της αντι-HBc είναι ζωτικής σημασίας κατά τη διάγνωση σε κλινικό περιβάλλον.Μαζί με άλλες εξετάσεις ηπατίτιδας Β, ο δείκτης anti- HBc επιτρέπει τη σωστή διάγνωση και την κατάλληλη παρακολούθηση της εξέλιξης του ιού.Το αντι- HBc μπορεί ενδεχομένως να είναι ο μόνος δείκτης λοίμωξης από ηπατίτιδα Β (συμπεριλαμβανομένων άλλων εξετάσεων ασθενών με HBsAg αρνητικό).

Υλικά και εξαρτήματα

ΜΙΚΡΟΠΛΑΤ:Χλωρές λωρίδες μικροκηλίδων που στερεώνονται σε λευκό κάλυμμα λωρίδας. Η πλάκα σφραγίζεται σε αλουμινένιο σάκο με αποξηρατικό. Κάθε πηγάδι περιέχει καθαρισμένο HBcAg. Οι λωρίδες μικροκηλίδων μπορούν να σπάσουν για χρήση ξεχωριστά.Τοποθετήστε μη χρησιμοποιημένα πηγάδια ή λωρίδες στην προμηθευόμενη πλαστική σφραγιστή σακούλα αποθήκευσης μαζί με το αποξηρατικό και επιστρέψτε σε 2-8 °CΜετά το άνοιγμα, σταθερό για ένα μήνα στους 2- 8°C.

Αρνητικός έλεγχος:(1x1, 0 ml ανά φιαλίδιο) διατηρητέα.00, 1% ProClinTM 300 Κίτρινο υγρό γεμάτο σε φιαλίδιο με πράσινο καπάκι βίδες. Το σταθεροποιημένο με πρωτεΐνες απόσβεση δοκιμάστηκε μη αντιδραστικό για HBcAb. Έτοιμο να χρησιμοποιηθεί όπως προμηθεύεται. Μόλις ανοίξει, σταθερό για ένα μήνα στους 2- 8 °C.

Θετικός έλεγχος:(1x1, 0 ml ανά φιαλίδιο) διατηρητέα.00, 1% ProClinTM 300 Ερυθρόχρωμο υγρό γεμάτο σε φιαλίδιο με κόκκινο καπάκι βίδες. HBcAb αραιωμένο σε σταθεροποιημένο με πρωτεΐνη απόθεμα. έτοιμο για χρήση όπως παρέχεται. Μόλις ανοιχτεί, σταθερό για ένα μήνα στους 2- 8°C.

ΚΟΝΓΟΓΑΤ:(1x6 ml ανά φιαλίδιο) διατηρητικά.00, 1% ProClinTM 300 Ερυθρόχρωμο υγρό σε λευκό φιαλίδιο με κόκκινο καπάκι βίδας.σταθερό για ένα μήνα στους 2-8°C.

ΠΛΗΡΙΣΤΙΚΟ ΚΑΤΑΡΟΥΛΟ:(1x20 ml ανά φιαλίδιο) ΑΠΟΤΗΣΗ ΠΡΟΣ ΧΡΗΣΗ! απορρυπαντικό Tween-20 Άχρωμο υγρό γεμάτο σε λευκό φιαλίδιο με λευκό καπάκι βίδες.PH 7.4, 20 × PBS Το συμπυκνωμένο πρέπει να αραιώνεται1 έως 19Μετά την αραίωση, σταθερό για μία εβδομάδα σε θερμοκρασία δωματίου ή για δύο εβδομάδες όταν φυλάσσεται στους 2-8°C.

Υποστρώμα Α:(1x6 ml ανά φιαλίδιο) Άχρωμο υγρό γεμάτο σε λευκό φιαλίδιο με πράσινο καπάκι βίδας.

Υποστρώμα Β:(1x6 ml ανά φιαλίδιο) Άχρωμο υγρό γεμάτο σε ένα μαύρο φιαλίδιο με μαύρο καπάκι με βίδα.TMB (τετραμεθυλοβενζιδίνη) διάλυμα.

Σταματήστε τη λύση:(1x6 ml ανά φιαλίδιο) Άχρωμο υγρό σε λευκό φιαλίδιο με λευκό καπάκι βίδας.₂Επομένως₄Όταν ανοίξει, σταθερό για ένα μήνα στους 2- 8°C.

ΠΛΑΣΤΙΚΗ ΣΑΚΑΣΙΑ:Για το κλείσιμο των λωρίδων που δεν χρησιμοποιούνται 1 μονάδα

ΕΠΙΤΡΟΠΟ1 αντίγραφο

ΠΕΡΙΛΗΣΗ από χαρτόνι2 φύλλα

Για να καλύπτουν τις πλάκες κατά τη διάρκεια της επώασης και να αποτρέπουν την εξάτμιση ή τη μόλυνση των πηγών.

ΔΙΚΑΛΗΣΗ

Παρασκευή αντιδραστηρίων:Επιτρέψτε στα αντιδραστήρια να φτάσουν σε θερμοκρασία δωματίου (18-30°C).Χρησιμοποιήστε απόσταγμα ή απιονισμένο νερό και μόνο καθαρά δοχεία για να αραιώσετε το απόθεμα ασφαλείαςΌλα τα άλλα αντιδραστήρια είναι:Έτοιμο για χρήση όπως παρέχεται.

1. Προετοιμασία:Τοποθετήστε όλες τις μη χρησιμοποιούμενες λωρίδες μικροκηλίδων πίσω στην σφραγίδα της σακούλας από αλουμίνιο και αποθηκεύστε τις σε θερμοκρασία 2-8°C.
2. Προσθήκη δείγματος:Προσθέστε 50 μl του δείγματος ελέγχου ή των δειγμάτων στο καθορισμένο πηγάδι.
3. Προσθήκη συνδυασμού:Προσθέστε 50μlΚΟΝΓΟΓΑΤΟΣε κάθε πηγάδι εκτός από το Blank.
4. Εμβολιασμός:Καλύψτε την πλάκα με την κάλυψη της πλάκας και επώασε για 30 λεπτάσε θερμοκρασία 37°C.
5. Πλύσιμο:Στο τέλος της επώασης, αφαιρέστε και πετάξτε το κάλυμμα του πιάτου. Πλύνετε κάθε πηγάδι 5 φορές με αραιωμένο υδροφωτοσυστήμα πλύσης. Κάθε φορά αφήστε τα μικροκύτταρα να βουτήξουν για 30-60 δευτερόλεπτα.Μετά τον τελευταίο κύκλο πλύσης, κατεβάστε την πλάκα σε χαρτί ή καθαρή πετσέτα και χτυπήστε την για να αφαιρέσετε τυχόν υπολείμματα.
6. Προσθήκη υποστρώματος:Προστίθενται 50μl υποστρώματος διαλύματος Α και 50μl υποστρώματος διαλύματος Β σε κάθε πηγάδι.10 λεπτά.σε θερμοκρασία 37°C, αποφεύγοντας το φως.
7. Προσθήκη της λύσης Stop:Χρησιμοποιώντας μια πολυκαναλική πιπέτα ή χειροκίνητα, προσθέστε50μΕγώ...του Stop Solution σε κάθε πηγάδι και αναμιγνύεται απαλά.
8. Μέτρηση της απορρόφησης:Καλιβρώστε τον αναγνώστη πινακίδων με το κενό πηγάδι και διαβάστε την απορρόφηση στο450nmΕάν χρησιμοποιείται μέσο διπλού φίλτρου, ορίστε το μήκος κύματος αναφοράς σε630nm. Υπολογίστε την τιμή διαχωρισμού και αξιολογήστε τα αποτελέσματα. (Σημείωση:ανάγνωση της απορρόφησης εντός10 λεπτά.μετά τη διακοπή της αντίδρασης).