Isoenzyme ΜΒ κινάσεων κρεατίνης αρουραίων εξάρτηση δοκιμής CK-ΜΒ ELISA RUO

Isoenzyme ΜΒ κινάσεων κρεατίνης αρουραίων CK-ΜΒ εξάρτηση της ELISA

• Για τον ποσοτικό τεχνητό προσδιορισμό isoenzyme ΜΒ κινάσεων κρεατίνης αρουραίων (CK-ΜΒ) των συγκεντρώσεων στον ορό αρουραίων, το πλάσμα, τα μέσα πολιτισμού ή οποιοδήποτε βιολογικό ρευστό.

Αρχή

Αυτή η εξάρτηση της ELISA χρησιμοποιεί την σάντουιτς-Elisa ως μέθοδο. Το Microelisa stripplate που παρέχεται σε αυτήν την εξάρτηση έχει καλυφθεί προηγουμένως με ένα αντίσωμα συγκεκριμένο για isoenzyme ΜΒ κινάσεων κρεατίνης (CK-ΜΒ) τα πρότυπα ή τα δείγματα προστίθενται στα κατάλληλα φρεάτια Microelisa stripplate και συνδυάζονται στο συγκεκριμένο αντίσωμα. Κατόπιν Peroxidase χρένου (HRP) - το κλιμένο αντίσωμα συγκεκριμένο για isoenzyme ΜΒ κινάσεων κρεατίνης (CK-ΜΒ) προστίθεται σε κάθε Microelisa stripplate καλά και επωάζεται. Τα ελεύθερα συστατικά πλένονται μακριά. Η λύση υποστρωμάτων TMB προστίθεται σε κάθε μια καλά. Μόνο εκείνα τα φρεάτια που περιέχουν isoenzyme ΜΒ κινάσεων κρεατίνης (CK-ΜΒ) και κλιμένο το HRP isoenzyme ΜΒ κινάσεων κρεατίνης (CK-ΜΒ) αντίσωμα θα εμφανιστούν μπλε στο χρώμα και θα γίνουν έπειτα κίτρινα μετά από την προσθήκη της λύσης στάσεων. Η οπτική πυκνότητα (OD) μετριέται spectrophotometrically σε ένα μήκος κύματος 450 NM. Η αξία OD είναι ανάλογη προς τη συγκέντρωση isoenzyme ΜΒ κινάσεων κρεατίνης (CK-ΜΒ). Μπορείτε να υπολογίσετε τη συγκέντρωση isoenzyme ΜΒ κινάσεων κρεατίνης (CK-ΜΒ) στα δείγματα με τη σύγκριση του OD των δειγμάτων με την τυποποιημένη καμπύλη.

Υλικά που παρέχονται την εξάρτηση

• Διάλυση των προτύπων

Δέκα φρεάτια τίθενται για τα πρότυπα σε ένα Microelisa stripplate. Σε καλά 1 και καλά 2, η τυποποιημένη λύση 100μl και ο τυποποιημένος απομονωτής διαλύσεων 50μl προστίθενται και αναμιγνύονται καλά. Σε καλά 3 και καλά 4, η λύση 100μl από καλά 1 και καλά 2 προστίθεται αντίστοιχα. Κατόπιν ο τυποποιημένος απομονωτής διαλύσεων 50μl προστίθεται και αναμιγνύεται καλά. 50μl η λύση απορρίπτεται από καλά 3 και καλά 4. Σε καλά 5 και καλά 6, η λύση 50μl από καλά 3 και καλά 4 προστίθεται αντίστοιχα. Κατόπιν ο τυποποιημένος απομονωτής διαλύσεων 50μl προστίθεται και αναμιγνύεται καλά. Σε καλά 7 και καλά 8, η λύση 50μl από καλά 5 και καλά 6 προστίθεται αντίστοιχα. Κατόπιν ο τυποποιημένος απομονωτής διαλύσεων 50μl προστίθεται και αναμιγνύεται καλά. Σε καλά 9 και καλά 10, η λύση 50μl από καλά 7 και καλά 8 προστίθεται αντίστοιχα. Κατόπιν ο τυποποιημένος απομονωτής διαλύσεων 50μl προστίθεται και αναμιγνύεται καλά. 50μl η λύση απορρίπτεται από καλά 9 και καλά 10. Μετά από τη διάλυση, ο συνολικός όγκος σε όλα τα φρεάτια είναι 50μl και οι συγκεντρώσεις είναι 15ng/ml, 10 ng/ml, 5ng/ml, 2.5ng/mland1.25ng/ml, αντίστοιχα.

Υπολογισμός των αποτελεσμάτων

  Οι γνωστές συγκεντρώσεις isoenzyme ΜΒ κινάσεων κρεατίνης αρουραίων (CK-ΜΒ) των προτύπων και της αντίστοιχης ανάγνωσής της OD σχεδιάζονται στην κλίμακα κούτσουρων (Χ-άξονας) και την κλίμακα κούτσουρων (Υ-άξονας) αντίστοιχα. Η συγκέντρωση isoenzyme ΜΒ κινάσεων κρεατίνης αρουραίων (CK-ΜΒ) στο δείγμα καθορίζεται με τη χάραξη του O.D. του δείγματος στον Υ-άξονα. Η αρχική συγκέντρωση υπολογίζεται με τον πολλαπλασιασμό του παράγοντα διαλύσεων.

Ακρίβεια

Ακρίβεια δια--δοκιμής (ακρίβεια μέσα σε μια δοκιμή): 3 δείγματα με χαμηλό, μέσο και υψηλού επιπέδου isoenzyme ΜΒ κινάσεων κρεατίνης αρουραίων (CK-ΜΒ) εξετάστηκαν 20 φορές σε ένα πιάτο, αντίστοιχα.

Ακρίβεια διά-δοκιμής (ακρίβεια μεταξύ των δοκιμών): 3 δείγματα με χαμηλό, μέσο και υψηλού επιπέδου Rt isoenzyme ΜΒ κινάσεων κρεατίνης (CK-ΜΒ) εξετάστηκαν σε 3 διαφορετικά πιάτα, 8 αντιγραφές σε κάθε πιάτο.

Βιογραφικό σημείωμα (%) = SD/meanX100

Δια--δοκιμή: Βιογραφικό σημείωμα<10>

Διά-δοκιμή: Βιογραφικό σημείωμα<12>

Σειρά δοκιμής

0,28 ng/ml - 18 ng/ml

Ευαισθησία:

0,04 ng/ml