Ινσουλίνη εξαρτήσεων προβάτων Igf1 Elisa όπως τον παράγοντα Ι αύξησης Somatomedin

Πρόβατα ινσουλίνη-όπως την αύξηση παράγοντας-ι, Somatomedin, εξάρτηση igf-ι ELISA

Αρχή

Αυτή η εξάρτηση της ELISA χρησιμοποιεί την σάντουιτς-Elisa ως μέθοδο. Το Microelisa stripplate που παρέχεται σε αυτήν την εξάρτηση έχει καλυφθεί προηγουμένως με ένα αντίσωμα συγκεκριμένο για igf-1. Τα πρότυπα ή τα δείγματα προστίθενται στα κατάλληλα φρεάτια Microelisa stripplate και συνδυάζονται στο συγκεκριμένο αντίσωμα. Κατόπιν Peroxidase χρένου (HRP) - το κλιμένο αντίσωμα συγκεκριμένο για igf-1 προστίθεται σε κάθε Microelisa stripplate καλά και επωάζεται. Τα ελεύθερα συστατικά πλένονται μακριά. Η λύση υποστρωμάτων TMB προστίθεται σε κάθε μια καλά. Μόνο εκείνα τα φρεάτια που περιέχουν igf-1 και HRP έκλιναν igf-1 αντίσωμα θα εμφανιστούν μπλε στο χρώμα και θα γίνουν έπειτα κίτρινα μετά από την προσθήκη της λύσης στάσεων. Η οπτική πυκνότητα (OD) μετριέται spectrophotometrically σε ένα μήκος κύματος 450 NM. Η αξία OD είναι ανάλογη προς τη συγκέντρωση igf-1. Μπορείτε να υπολογίσετε τη συγκέντρωση igf-1 στα δείγματα με τη σύγκριση του OD των δειγμάτων με την τυποποιημένη καμπύλη.

Υλικά που παρέχονται την εξάρτηση

Ακρίβεια

Ακρίβεια δια--δοκιμής (ακρίβεια μέσα σε μια δοκιμή): 3 δείγματα με χαμηλό, μέσος και το υψηλό επίπεδο igf-1 εξετάστηκαν 20 φορές σε ένα πιάτο, αντίστοιχα.

Ακρίβεια διά-δοκιμής (ακρίβεια μεταξύ των δοκιμών): 3 δείγματα με χαμηλό, μέσος και το υψηλό επίπεδο igf-1 εξετάστηκαν σε 3 διαφορετικά πιάτα, 8 αντιγραφές σε κάθε πιάτο.

Βιογραφικό σημείωμα (%) = SD/meanX100

Δια--δοκιμή: Βιογραφικό σημείωμα<10>

Διά-δοκιμή: Βιογραφικό σημείωμα<12>

Σειρά δοκιμής

0.3ng/ml -20 ng/ml

Ευαισθησία:

0.05ng/ml

Σημειώσεις:

• Αποθηκεύστε την εξάρτηση σε 4°C επάνω στην παραλαβή. Η εξάρτηση πρέπει να εξισορροπηθεί στη θερμοκρασία δωματίου πριν από τη δοκιμή. Αφαιρέστε οποιεσδήποτε αχρείαστες λουρίδες από βοοειδές igf-1 αντίσωμα-ντυμένο πιάτο, τις ξανασφραγίστε zip-lock στο φύλλο αλουμινίου και κρατήστε σε 4°C.
• Τα ιζήματα μπορούν να εμφανιστούν στο συγκεντρωμένο πλένοντας απομονωτή. Παρακαλώ θερμάνετε τον απομονωτή για να διαλύσετε όλα τα ιζήματα, τα οποία δεν έχουν επιπτώσεις στα αποτελέσματα.
• Το ακριβές σιφώνιο πρέπει να χρησιμοποιηθεί για να αποφύγει το πειραματικό λάθος. Τα δείγματα πρέπει να προστεθούν στο Microplate σε λιγότερο από 5 λεπτά. Εάν ένας μεγάλος αριθμός δειγμάτων συμπεριλαμβάνεται, το πολλαπλάσιο σιφώνιο καναλιών συστήνεται.
• Η τυποποιημένη καμπύλη πρέπει να περιληφθεί σε κάθε δοκιμή. Τα ξαναδιπλωμένα φρεάτια συστήνονται. Εάν η αξία OD του δείγματος είναι μεγαλύτερη από το πρώτο καλά των προτύπων, παρακαλώ αραιώστε το δείγμα (χρόνοι ν) πριν από τη δοκιμή. Κατά υπολογισμό του origina igf-1 τη συγκέντρωση, παρακαλώ πολλαπλασιάζει το συνολικό παράγοντα διαλύσεων (XnX5).
• Προκειμένου να αποφευχθεί η παράλληλη μόλυνση, sealers Microplate πρόκειται για τη one-time χρήση μόνο.
• Παρακαλώ κρατήστε το υπόστρωμα μακρυά από το φως.
• Όλη η λειτουργία πρέπει να είναι συμφωνία με τις οδηγίες του κατασκευαστή αυστηρά. Τα αποτελέσματα που καθορίζονται από το Microtiter αναγνώστη πιάτων.
• Όλοι τα δείγματα, ο πλένοντας απομονωτής και τα απόβλητα πρέπει να επεξεργαστούν ως μολυσματικοί πράκτορες.
• Τα αντιδραστήρια από τα διαφορετικά μέρη δεν πρέπει να αναμιχθούν.