HE4 Πρωτεΐνη 4 του ανθρώπινου επιδιδύμιουΕλέγχου Elisa

Σκοπός

Η δοκιμή HE4 είναι μια ενζυματική ανοσοαπορροφητική δοκιμή (ELISA) για τον ποσοτικό προσδιορισμό in vitro της πρωτεΐνης 4 (HE4) του ανθρώπινου επιδιδίμου στον ανθρώπινο ορό.Επιπλέον, προορίζεται να χρησιμοποιηθεί σε συνδυασμό με το CA125 ως βοηθητικό μέσο για την εκτίμηση του κινδύνου εμφάνισης καρκίνου των επιθηλιακών ωοθηκών σε προεμμηνοπαυσιακές και μεταεμμηνοπαυσιακές γυναίκες με πυελική μάζα..

Σύνοψη

Η πρωτεΐνη 4 του ανθρώπινου επιδίδειου (HE4) ανήκει στην οικογένεια των πρωτεϊνών οξέος τεσσάρων δισουλφιδικών πυρήνων ορού γάλακτος (WFDC) με υπόπτες ιδιότητες αναστολέα της τριψίνης.Ελαφίνη, και PS20 (WFDC1). Το γονίδιο HE4 κωδικοποιεί μια πρωτεΐνη 13kD, αν και στην ώριμη γλυκοζυλιωμένη μορφή της η πρωτεΐνη είναι περίπου 20-25 kD, και αποτελείται από ένα μόνο πεπτίδιο που περιέχει δύο τομείς WFDC.Το HE4 εντοπίστηκε για πρώτη φορά στο επιθήλιο του απομακρυσμένου επιδιδύμου και αρχικά προβλεπόταν ότι είναι ένας αναστολέας πρωτεάσης που εμπλέκεται στη ωρίμανση των σπερματοζωαρίων.Έκτοτε, έχει αναφερθεί ότι το HE4 εκφράζεται σε αρκετούς φυσιολογικούς ιστούς, συμπεριλαμβανομένου του επιθηλίου των αναπνευστικών και αναπαραγωγικών ιστών, καθώς και στον καρκίνο των ωοθηκών.Εκτός από την έκφραση σε κυτταρικό επίπεδο, το HE4 που εκκρίνεται έχει ανιχνευθεί σε υψηλά επίπεδα στο ορό ασθενών με καρκίνο των ωοθηκών.Σε μελέτη περιπτώσεων/ελέγχου που συνέκρινε ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών με υγιείς και καλοήθεις ασθενείς, Hellström et al. διαπίστωσαν ότι το HE4 ανίχνευσε καρκίνο των ωοθηκών με ευαισθησία 67% σε επίπεδο ιδιαιτερότητας 96%.Το HE4 έδειξε την υψηλότερη ευαισθησία για την ανίχνευση του καρκίνου των ωοθηκώνΣε αυτή τη μελέτη, ο συνδυασμός του HE4 και του CA 125 ήταν πιο ακριβής προγνωστικός δείκτης κακοήθειας από ό,τι ο καθένας από τους δύο δείκτες από μόνος του.με ευαισθησία 76% και ειδικότητα 95%Ο καρκίνος των ωοθηκών είναι η τέταρτη συχνότερη αιτία θανάτου από καρκίνο στις γυναίκες παγκοσμίως.το τεστ ELISA HE4 μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε συνδυασμό με το τεστ CA125 ως βοηθητικό μέσο για την εκτίμηση του κινδύνου ότι η ασθενής έχει επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκώνΤα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται σε συνδυασμό με άλλες μεθόδους σύμφωνα με τις τυποποιημένες κατευθυντήριες γραμμές κλινικής διαχείρισης.Μια πρόσθετη χρήση του ELISA HE4 είναι ως βοηθητικό μέσο παρακολούθησης της απόκρισης στη θεραπεία για ασθενείς με επεμβατικό επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών.Τα αποτελέσματα πρέπει να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με άλλες κλινικές μεθόδους που χρησιμοποιούνται για την παρακολούθηση του καρκίνου των ωοθηκών.

Αρχή δοκιμής

Η αρχή του σάντουιτς σε ένα βήμα.

Συνολική διάρκεια της δοκιμής: 80 λεπτά.

• Συνδυάζονται δείγμα, επικαλυμμένα με αντισώματα HE4 μικροκύτταρα και μονοκλωνικό αντισώμα HE4 με ένζυμο.

• Κατά τη διάρκεια της επώασης, το HE4 που βρίσκεται στο δείγμα επιτρέπεται να αντιδράσει ταυτόχρονα με τα δύο αντισώματα,με αποτέλεσμα τα μόρια HE4 να βρίσκονται ανάμεσα στην στερεή φάση και τα ενζυματικά συνδεδεμένα αντισώματα.

• Μετά το πλύσιμο, παράγεται ένα σύμπλεγμα μεταξύ της στερεής φάσης, του HE4 στο δείγμα και των ενζυματικών αντισωμάτων μέσω ανοσολογικών αντιδράσεων.

• Στη συνέχεια προστίθεται το υποστρώμα διαλύματος και καταλύεται από αυτό το σύμπλεγμα, με αποτέλεσμα μια χρωμογενή αντίδραση.

• Η απορρόφηση είναι ανάλογη με την ποσότητα HE4 στο δείγμα.