Αντι-Μυλλέριος Ορμόνη (ELISA)

Δοκιμή ανοσοενζυμικής ανάλυσης AMH Elisa AMH
Περιγραφή Προϊόντος:

Η δοκιμή AMH είναι μια δοκιμασία ανοσοπροσροφητικού συνδεδεμένου με ένζυμο (ELISA) για τον in vitro ποσοτικό προσδιορισμό της Αντι-Μυλλέριου Ορμόνης (AMH) στον ορό του ανθρώπου. Μόνο για επαγγελματική χρήση.

Σύνοψη

Η αντι-Μυλλέριος ορμόνη (AMH) είναι μια γλυκοπρωτεϊνική ορμόνη δομικά συγγενής με την ινιμπίνη και την ακτιβίνη από την υπεροικογένεια του μετασχηματιστικού αυξητικού παράγοντα βήτα, οι βασικοί ρόλοι της οποίας είναι στην ανάπτυξη, τη διαφοροποίηση και τη θυλακιογένεση.1

Στα αρσενικά έμβρυα, η AMH παράγεται από τα κύτταρα Sertoli και προκαλεί την παλινδρόμηση του πόρου Müllerian και επομένως προάγει την ανάπτυξη του αρσενικού αναπαραγωγικού συστήματος.2 Τα αρσενικά βρέφη έχουν πολύ υψηλά επίπεδα AMH (>30 ng/ml) που μειώνονται αργά μέχρι την μετεφηβεία, όπου παραμένει σε χαμηλό επίπεδο (<10 ng/ml).3,4

Στα θηλυκά, η AMH αρχίζει να παράγεται κοντά στην ώρα της γέννησης με τα επίπεδα να αυξάνονται μέχρι την εφηβεία. Μετά την εφηβεία, τα επίπεδα AMH στο αίμα μειώνονται μέχρι την εμμηνόπαυση, όπου γίνεται σχεδόν μη ανιχνεύσιμη (4.7 ng/ml, 80% CI) στις γυναίκες είναι μια ένδειξη του συνδρόμου πολυκυστικών ωοθηκών (PCOS).5

Όταν τα επίπεδα AMH πέσουν κάτω από 1,0 ng/ml στις γυναίκες, θεωρείται ότι έχουν χαμηλή ωοθηκική εφεδρεία. Οι ασθενείς σε αυτά τα εύρη συνιστάται να μην καθυστερήσουν τον οικογενειακό προγραμματισμό ή να υποβληθούν σε θεραπείες υπογονιμότητας όπως η εξωσωματική γονιμοποίηση.5,6

Το κιτ ELISA AMH μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την παρακολούθηση της προόδου των θεραπειών υπογονιμότητας των ασθενών και την προσέγγιση της έναρξης της εμμηνόπαυσης.

• Απορρίψτε τα περιεχόμενα της μικροπλάκας με απόχυση ή αναρρόφηση. Εάν κάνετε απόχυση, χτυπήστε και στεγνώστε την πλάκα με απορροφητικό χαρτί.

Εφαρμογές:

Η Αντι-Μυλλέριος Ορμόνη (AMH) είναι μια ορμόνη που παράγεται από τις ωοθήκες και η συγκέντρωσή της μπορεί να αντικατοπτρίζει την ωοθηκική εφεδρεία μιας γυναίκας, δηλαδή τον αριθμό των ωαρίων που έχει. Η AMH ELISA (δοκιμασία ανοσοπροσροφητικού συνδεδεμένου με ένζυμο) είναι μια συνήθως χρησιμοποιούμενη μέθοδος δοκιμής που μπορεί να μετρήσει τη συγκέντρωση AMH στο αίμα. Η AMH ELISA έχει ένα ευρύ φάσμα εφαρμογών στις ακόλουθες πτυχές:

1. **Σχεδιασμός γονιμότητας**: Η συγκέντρωση AMH μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την αξιολόγηση της γονιμότητας μιας γυναίκας. Τα υψηλότερα επίπεδα AMH υποδεικνύουν γενικά μια πλούσια ωοθηκική εφεδρεία, ενώ τα χαμηλότερα επίπεδα AMH μπορεί να υποδεικνύουν μειωμένη ωοθηκική εφεδρεία, η οποία μπορεί να επηρεάσει τη γονιμότητα.

2. **Αξιολόγηση υπογονιμότητας**: Για γυναίκες που υποβάλλονται σε θεραπεία υπογονιμότητας, η δοκιμή AMH μπορεί να βοηθήσει τους γιατρούς να αξιολογήσουν την ωοθηκική τους εφεδρεία και να καθοδηγήσουν την επιλογή των επιλογών θεραπείας.

3. **Αξιολόγηση ωορρηκτικής λειτουργίας**: Η συγκέντρωση AMH μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την αξιολόγηση της ωορρηκτικής λειτουργίας μιας γυναίκας, ειδικά σε περιπτώσεις που σχετίζονται με το σύνδρομο πολυκυστικών ωοθηκών (PCOS).

4. **Παρακολούθηση ωοθηκικής λειτουργίας**: Η συγκέντρωση AMH μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για την παρακολούθηση της ωοθηκικής λειτουργίας μιας γυναίκας, όπως μετά από χημειοθεραπεία ή ακτινοθεραπεία, ή πριν και μετά από χειρουργική επέμβαση.

5. **Πρόβλεψη ηλικίας γονιμότητας**: Η αξιολόγηση της συγκέντρωσης AMH μπορεί να βοηθήσει τις γυναίκες να κατανοήσουν την ηλικία τεκνοποίησής τους. Τα χαμηλότερα επίπεδα AMH μπορεί να σημαίνουν ότι μπορεί να μπουν στην εμμηνόπαυση σε νεότερη ηλικία, κάτι που είναι ζωτικής σημασίας για τον οικογενειακό προγραμματισμό.

Συνοπτικά, η AMH ELISA έχει σημαντική αξία εφαρμογής στον σχεδιασμό γονιμότητας, την αξιολόγηση υπογονιμότητας, την αξιολόγηση της ωορρηξίας, την παρακολούθηση της ωοθηκικής λειτουργίας και την πρόβλεψη της ηλικίας τεκνοποίησης.

Προσαρμογή:

Υπηρεσίες προσαρμογής προϊόντων:

Επωνυμία: Biovantion

Αριθμός μοντέλου: 0081

Τόπος προέλευσης: Κίνα

Πιστοποίηση: ISO13485

Ελάχιστη ποσότητα παραγγελίας: 50

Τιμή: Διαπραγματεύσιμη

Χρόνος παράδοσης: 7-15 ημέρες

Τύπος δείγματος: Ορός/ Πλάσμα

Μέθοδος δοκιμής: ELISA

Διάρκεια ζωής: 24 μήνες

Θερμοκρασία αποθήκευσης: 2-30℃

Εφαρμογή: Κλινική, Νοσοκομείο, Εργαστήριο/ Σπίτι

Πρόσθετα χαρακτηριστικά: Αυτοέλεγχος, Βοηθήματα, Ούρα

Αρχή δοκιμής:

Αρχή σάντουιτς. Συνολική διάρκεια της δοκιμής: 80 λεπτά.

• Δείγμα, μικροφρεάτια επικαλυμμένα με Anti-AMH και ένζυμο-επισημασμένο Anti-AMH συνδυάζονται.

• Κατά τη διάρκεια της επώασης, η AMH που υπάρχει στο δείγμα επιτρέπεται να αντιδρά ταυτόχρονα με τα δύο αντισώματα, με αποτέλεσμα τα μόρια AMH να παγιδεύονται μεταξύ της στερεάς φάσης και των αντισωμάτων που συνδέονται με ένζυμο.

• Μετά το πλύσιμο, δημιουργείται ένα σύμπλεγμα μεταξύ της στερεάς φάσης, της AMH εντός του δείγματος και των αντισωμάτων που συνδέονται με ένζυμο με ανοσολογικές αντιδράσεις.

• Στη συνέχεια προστίθεται διάλυμα υποστρώματος και καταλύεται από αυτό το σύμπλεγμα, με αποτέλεσμα μια χρωμογόνο αντίδραση. Η προκύπτουσα χρωμογόνος αντίδραση μετράται ως απορρόφηση.

• Η απορρόφηση είναι ανάλογη με την ποσότητα AMH στο δείγμα.

Προφυλάξεις και προειδοποιήσεις:

• Μόνο για διαγνωστική χρήση in vitro.

• Ασκείτε τις κανονικές προφυλάξεις που απαιτούνται για το χειρισμό όλων των αντιδραστηρίων εργαστηρίου.

• Η απόρριψη όλων των απορριμμάτων πρέπει να γίνεται σύμφωνα με τις τοπικές οδηγίες.

• Μην χρησιμοποιείτε αντιδραστήρια πέρα από την αναγραφόμενη ημερομηνία λήξης.

• Μην αναμιγνύετε ή χρησιμοποιείτε εξαρτήματα από κιτ με διαφορετικούς κωδικούς παρτίδας.

• Όλα τα δείγματα και τα απόβλητα αντίδρασης θα πρέπει να θεωρούνται δυνητικά βιολογικά επικίνδυνα. Ο χειρισμός των δειγμάτων και των αποβλήτων αντίδρασης θα πρέπει να γίνεται σύμφωνα με τους τοπικούς κανονισμούς και οδηγίες.

• Το Stop Solution περιέχει θειικό οξύ, το οποίο μπορεί να προκαλέσει σοβαρά εγκαύματα. Σε περίπτωση επαφής με τα μάτια, ξεπλύνετε αμέσως με άφθονο νερό και ζητήστε ιατρική συμβουλή.

• Τα εξουδετερωμένα οξέα και άλλα υγρά απόβλητα θα πρέπει να απολυμαίνονται προσθέτοντας επαρκή όγκο υποχλωριώδους νατρίου για να ληφθεί τελική συγκέντρωση τουλάχιστον 1,0%. Η έκθεση σε 1,0% υποχλωριώδες νάτριο για 30 λεπτά μπορεί να είναι απαραίτητη για την εξασφάλιση αποτελεσματικής απολύμανσης.

• Ορισμένα αντιδραστήρια περιέχουν 0,05% ή 0,1% ProClin 300 που μπορεί να προκαλέσει ευαισθητοποίηση με επαφή με το δέρμα, η οποία πρέπει επομένως να αποφεύγεται. Τα αντιδραστήρια και τα δοχεία τους πρέπει να απορρίπτονται με ασφάλεια. Σε περίπτωση κατάποσης, ζητήστε αμέσως ιατρική συμβουλή και δείξτε αυτό το δοχείο ή την ετικέτα.

• Το υπόστρωμα έχει ερεθιστική δράση στο δέρμα και τους βλεννογόνους. Σε περίπτωση πιθανής επαφής, ξεπλύνετε τα μάτια με άφθονο νερό και το δέρμα με σαπούνι και άφθονο νερό. Πλύνετε τα μολυσμένα αντικείμενα πριν τα επαναχρησιμοποιήσετε. Σε περίπτωση εισπνοής, μεταφέρετε το άτομο σε καθαρό αέρα.

• Για πληροφορίες σχετικά με τις επικίνδυνες ουσίες που περιλαμβάνονται στο κιτ, ανατρέξτε στο Δελτίο Δεδομένων Ασφαλείας Υλικού (MSDS), το οποίο είναι διαθέσιμο κατόπιν αιτήματος.

• Μην καπνίζετε, μην πίνετε, μην τρώτε και μην εφαρμόζετε καλλυντικά στην περιοχή εργασίας.

• Μην πιπιλίζετε από το στόμα. Φοράτε προστατευτικά ρούχα, γάντια μιας χρήσης και προστασία ματιών/προσώπου κατά το χειρισμό δειγμάτων και αντιδραστηρίων. Πλύνετε τα χέρια μετά τη χρήση.

• Εάν κάποιο από τα αντιδραστήρια έρθει σε επαφή με το δέρμα ή τα μάτια, ξεπλύνετε την περιοχή εκτενώς με νερό.

Αποθήκευση και σταθερότητα

• Αποθηκεύστε στους 2-8℃ .

• Σφραγίστε και επιστρέψτε τα αχρησιμοποίητα αντιδραστήρια στους 2-8℃, υπό τις οποίες συνθήκες η σταθερότητα θα διατηρηθεί για 2 μήνες ή μέχρι την αναγραφόμενη ημερομηνία λήξης, όποια είναι νωρίτερη.

Συλλογή και προετοιμασία δείγματος• Συνιστάται ο ορός του ανθρώπου για αυτή τη δοκιμή.

• Κλείστε και αποθηκεύστε τα δείγματα στους 18-25 ℃ για όχι περισσότερο από 8 ώρες. Σταθερό για 7 ημέρες στους 2-8℃ και 1 μήνα στους -20℃ . Καταψύξτε μόνο μία φορά.

• Μην χρησιμοποιείτε θερμικά απενεργοποιημένα δείγματα.

• Τα ιζήματα και τα αιωρούμενα στερεά στα δείγματα μπορεί να επηρεάσουν το αποτέλεσμα της δοκιμής, τα οποία θα πρέπει να αφαιρεθούν με φυγοκέντρηση. Βεβαιωθείτε ότι έχει σχηματιστεί πλήρης θρόμβος στα δείγματα ορού πριν από τη φυγοκέντρηση.

• Αποφύγετε τα χονδροειδώς αιμολυτικά, λιπαιμικά ή θολερά δείγματα.

Βαθμονόμηση

Η AMH ELISA έχει τυποποιηθεί έναντι του Εθνικού Ινστιτούτου Βιολογικών Προτύπων και Ελέγχου (NIBSC) κωδικός 16/190.

Συνιστάται η επαναβαθμονόμηση όταν χρησιμοποιείται μια νέα παρτίδα αντιδραστηρίου ή οι ποιοτικοί έλεγχοι είναι εκτός καθορισμένου εύρους.

Ποιοτικός έλεγχος

Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να έχει ελέγχους δοκιμασίας σε επίπεδα στο χαμηλό, φυσιολογικό και αυξημένο εύρος για την παρακολούθηση της απόδοσης της δοκιμασίας. Οι έλεγχοι θα πρέπει να αντιμετωπίζονται ως άγνωστα και οι τιμές να προσδιορίζονται σε κάθε διαδικασία δοκιμής που εκτελείται. Η συνιστώμενη απαίτηση ελέγχου για αυτή τη δοκιμασία είναι η αγορά υλικών ελέγχου ακρίβειας ξεχωριστά και η δοκιμή τους μαζί με τα δείγματα στην ίδια διαδρομή. Το αποτέλεσμα είναι έγκυρο εάν οι τιμές ελέγχου εμπίπτουν στα εύρη συγκέντρωσης που αναγράφονται στις ετικέτες.

Διάλυμα πλύσης (40X

αραίωση) Προσθέστε απεσταγμένο νερό στο συμπυκνωμένο διάλυμα πλύσης 40X.

Αραιώστε 25 mL συμπυκνώματος διαλύματος πλύσης με 975 mL απεσταγμένου νερού σε τελικό όγκο 1000 mL. Σταθερό για 2 μήνες σε θερμοκρασία δωματίου.

Διαδικασία δοκιμής

Βεβαιωθείτε ότι τα δείγματα των ασθενών, οι βαθμονομητές και οι έλεγχοι είναι σε θερμοκρασία περιβάλλοντος (18-25 ℃) πριν από τη μέτρηση. Ανακατέψτε όλα τα αντιδραστήρια αναποδογυρίζοντας απαλά πριν από τη χρήση. • Χρησιμοποιήστε μόνο τον αριθμό των φρεατίων που απαιτούνται και μορφοποιήστε τα φρεάτια των μικροπλακών για κάθε βαθμονομητή και δείγμα που θα αναλυθεί.

• Προσθέστε

50

µL από διάλυμα διακοπής σε κάθε φρεάτιο.δείγματα σε κάθε φρεάτιο.• Προσθέστε 5015-20 δευτερόλεπτα

µL από διάλυμα διακοπής σε κάθε φρεάτιο.την 15-20 δευτερόλεπτα

απαλά για 30 δευτερόλεπτα για να ανακατευτούν.• Καλύψτε την πλάκα με ένα καπάκι πλάκας και επωάστε στους 37

℃ για στο σκοτάδι για αντίδραση για λεπτά. Σημείωση: Η θερμοκρασία επώασης μεταξύ 37-40℃ είναι αποδεκτή, αλλά δεν μπορεί να είναι χαμηλότερη από 37℃, διαφορετικά τα αποτελέσματα των δοκιμών θα είναι χαμηλότερα!• Απορρίψτε τα περιεχόμενα της μικροπλάκας με απόχυση ή αναρρόφηση. Εάν κάνετε απόχυση, χτυπήστε και στεγνώστε την πλάκα με απορροφητικό χαρτί.

• Προσθέστε

350

µL από διάλυμα πλύσης, απορρίψτε (χτυπήστε και στεγνώστε) ή αναρροφήστε. Επαναλάβετε 4 επιπλέον φορές για συνολικά 5 πλύσεις. Μπορεί να χρησιμοποιηθεί ένα αυτόματο πλυντήριο μικροπλακών. Στο τέλος του πλυσίματος, αναποδογυρίστε την πλάκα και χτυπήστε τυχόν υπολειμματικό διάλυμα πλύσης σε απορροφητικό χαρτί.• Προσθέστε 100

µL από διάλυμα διακοπής σε κάθε φρεάτιο.• Καλύψτε και 15-20 δευτερόλεπτα

σε θερμοκρασία περιβάλλοντος (18-25℃) στο σκοτάδι για αντίδραση για 20 λεπτά. Μην ανακινείτε την πλάκα μετά την προσθήκη υποστρώματος.• Προσθέστε 50

µL από διάλυμα διακοπής σε κάθε φρεάτιο.• Ανακινήστε για 15-20 δευτερόλεπτα

για να ανακατευτεί το υγρό μέσα στα φρεάτια. Είναι σημαντικό να διασφαλιστεί ότι το μπλε χρώμα αλλάζει σε κίτρινο εντελώς.• Διαβάστε την απορρόφηση κάθε φρεατίου στα 450

nm (χρησιμοποιώντας 620 έως 630 nm ως το μήκος κύματος αναφοράς για την ελαχιστοποίηση των ατελειών των φρεατίων) σε έναν αναγνώστη μικροπλακών. Τα αποτελέσματα θα πρέπει να διαβαστούν εντός 30 λεπτών από την προσθήκη του διαλύματος διακοπής.Υπολογισμός• Καταγράψτε την απορρόφηση που λαμβάνεται από την εκτύπωση του αναγνώστη μικροπλακών.

• Υπολογίστε τη μέση απορρόφηση τυχόν διπλών μετρήσεων και χρησιμοποιήστε τη μέση τιμή για τον ακόλουθο υπολογισμό.

• Σχεδιάστε τον κοινό λογάριθμο της απορρόφησης έναντι της συγκέντρωσης σε ng/mL για κάθε βαθμονομητή.

• Σχεδιάστε την καμπύλη καλύτερης εφαρμογής μέσω των σημείων που σχεδιάστηκαν σε γραμμικό χαρτί. Η μέθοδος Point-to-Point προτείνεται για τη δημιουργία μιας καμπύλης βαθμονόμησης.

Τα ακόλουθα δεδομένα είναι μόνο για επίδειξη και δεν μπορούν να χρησιμοποιηθούν αντί για τη δημιουργία δεδομένων κατά τη στιγμή της δοκιμασίας.